Сообщество дом 2 вк: Фитиль Дом 2 | группа

CommunityMoscow
Moscow, Russian Federation

#communitymoscow

Космодамианская наб., 2, Москва, 8 (499) 811-08-11

Голосовой помощник Mail.ru научился заказывать такси

«Маруся», голосовой помощник, разработанный Mail.ru Group, получил новый экосистемный навык и теперь может заказать такси для пользователя.

Чтобы узнать стоимость поездки, достаточно сказать «Марусе»: «Закажи такси», назвать исходный адрес и пункт назначения. Голосовой помощник озвучит, во сколько обойдется поездка, и предложит подтвердить заказ в один клик в мини-приложении «Такси Вконтакте», созданным «Вконтакте» и «Ситимобил» — его можно найти во вкладке «Сервисы» в суперприложении. Там же при необходимости можно изменить адреса и опции заказа.

Для поездок на работу и обратно можно задать адрес офиса и домашний адрес. Тогда «Маруся» сможет вызывать авто по нужному маршруту по команде «Закажи такси из дома на работу» или «Закажи такси с работы домой».

После оформления заказа «Маруся» с помощью push-уведомления будет сообщать пользователю о его статусе.

«Мы работаем над тем, чтобы сделать «Марусю» удобнее, научить ее решать больше повседневных задач внутри экосистемы VK и дать нашей аудитории возможность использовать привычные сервисы голосом. Вызов такси — популярный запрос. Мы соединяем опыт заказа голосом и возможности приложения. Так же, как если бы вы попросили заказать своего ассистента такси, а потом отслеживали где сесть в авто в приложении», – отметил Анатолий Кульбацкий, директор по продукту «Маруся» в Mail.ru Group.

«Такси Вконтакте» — это первый в России опыт полной интеграции сервиса заказа такси в экосистему VK, и интеграция с «Марусей» — шаг к тому, чтобы сделать заказ такси еще более удобным и технологичным.

Главная особенность «Такси Вконтакте» — доступ к социальным функциям VK. Например, с помощью «Такси Вконтакте» можно разделить стоимость поездки с другом, поделиться с ним маршрутом или заказать машину прямо из сообщества «Вконтакте». Заказывать такси и оплачивать поездки можно прямо внутри суперприложения «Вконтакте» с помощью банковской карты или VK Pay, а также пользователям доступны скидки от VK Combo.

«Маруся» входит в экосистему VK. С помощью голосового помощника можно прочитать письма из «Почты Mail.ru», повторить последний заказ из Delivery Club и узнать свежие новости или прогноз погоды. Помимо этого, «Маруся» интегрирована во «Вконтакте» – голосовой помощник может позвонить вашим друзьям, найти интересующее вас сообщество, включить любую песню или подкаст и выполнить многие другие запросы.

Против Навального и его сторонников возбудили дело об экстремистском сообществе

Дмитрий Кандинский / vtomske.ru

Следственный комитет возбудил уголовное дело о создании экстремистского сообщества и участии в нем в отношении оппозиционного политика Алексея Навального и его главных сторонников. Об этом сообщает СК РФ.

Уголовное дело по части 1 статьи 282.1 УК РФ (создание и руководство экстремистским сообществом) возбуждено в отношении Алексея Навального, Леонида Волкова, Ивана Жданова, а также «иных лиц», но каких именно — СК не конкретизирует.

А по части 2 статьи 282.1 УК РФ (участие в экстремистском сообществе) дело возбуждено против Любови Соболь, Геннадия Албурова, Руслана Шаведдинова, Вячеслав Гимади и еще ряда лиц.

По версии СК, Навальный не позднее 2014 года «создал экстремистское сообщество с целью осуществления экстремистской деятельности, направленной на изменение основ конституционного строя в РФ, подрыва общественной безопасности и государственной целостности». Позже к политику присоединились Волков и Жданов.

Следствие утверждает, что для работы этого сообщества и привлечения новых участников организаторы создали восемь организаций (фонды и коммерческие организации). Для «пропаганды преступной деятельности в сети» были созданы сайты ФБК*, штабов Навального*, аккаунте в соцсетях.

«В целях расширения сферы преступной деятельности в 2017 году создано общественное движение «Штабы Навального» для осуществления деятельности сообщества в 37 регионах России. Основным куратором и руководителем штабов* являлся Волков. <…> В период с 2014 по 2021 год в состав сообщества вошли Соболь, Албуров, Шаведдинов, Гимади и иные лица, а также руководители и сотрудники штабов в регионах», — говорится в сообщении следственного комитета.

По версии СК, деятельность сообщества была направлена «на дискредитацию органов государственной власти и проводимой ими политики, дестабилизацию обстановки в регионах, создание протестного настроения у населения и формирование общественного мнения о необходимости насильственной смены власти, организацию и проведение протестных акций, перерастающих в массовые беспорядки».

Для этого в 2014—2021 годы руководители и участники сообщества, как считает СК, проводили в российских городах несогласованные публичные мероприятия. Следствие утверждает, что в ходе таких акций звучали призывы к экстремистской и террористической деятельности, был причинен «вред общественному порядку и общественной безопасности».

Напомним, некоммерческая организация «Фонд борьбы с коррупцией» (ФБК, признана в России иностранным агентом) была создана Алексеем Навальным в 2011 году. ФБК занимался раскрытием коррупционных схем в высших органах российской власти.

В 2021 году ФБК и другие организации, связанные с Навальным, были признаны решением суда экстремистскими по жалобе московской прокуратуры.

*Деятельность ФБК, Фонда защиты прав граждан и штабов Навального признана экстремистской и запрещена на территории РФ

СК возбудил дело в отношении Навального о создании экстремистского сообщества — Происшествия

МОСКВА, 28 сентября. /ТАСС/. Следственный комитет РФ возбудил уголовное дело против Алексея Навального о создании экстремистского сообщества. Об этом во вторник журналистам сообщили в пресс-службе СК.

Там пояснили, что Главное следственное управление СК возбудило уголовное дело по ч. 1 ст. 282.1 Уголовного кодекса (создание и руководство экстремистским сообществом) против «А. Навального, Л. Волкова, И. Жданова и иных лиц» и по ч. 2 ст. 282.1 Уголовного кодекса (участие в экстремистском сообществе) «против Л. Соболь, Г. Албурова, Р. Шаведдинова, В. Гимади, П. Зеленского, Р. Мулюкова и иных лиц». 

Защиту Навального не уведомляли о возбуждении нового уголовного дела об экстремизме, заявил адвокат Вадим Кобзев. «Защита пока официально не была уведомлена о возбуждении нового дела об экстремизме. Никаких следственных действий не проводилось. Пока прокомментировать эту информацию по существу я не могу», — сказал адвокат.

Как уточнил ТАСС источник в правоохранительных органах, большая часть фигурантов дела находятся за пределами РФ, они могут быть арестованы заочно. «По имеющимся в данный момент информации, Леонид Волков, Иван Жданов, Любовь Соболь, Георгий Албуров, Руслан Шаведдинов находятся за пределами России.

Причина дела

По данным СК, не позднее 2014 года Навальный как учредитель Фонда борьбы с коррупцией (ФБК, организация признана экстремистской и ликвидирована на территории РФ) «создал экстремистское сообщество и руководил им» для осуществления экстремистской деятельности, которая направлена на изменение основ конституционного строя в РФ, подрыва общественной безопасности и государственной целостности. В этот период к преступной деятельности Навального присоединились Жданов и Волков. В СК отметили, что для обеспечения деятельности экстремистского сообщества, в том числе его финансирования, а также создания условий для совершения преступлений экстремистской направленности, вовлечения новых участников организаторы учредили восемь некоммерческих организаций — фондов и коммерческие организации, которые являлись структурными подразделениями сообщества.

Общественное движение «Штабы Навального» (организация признана в РФ экстремистской) в 2017 году  было создано в 37 регионах страны. «Основным куратором и руководителем «Штабов Навального» являлся Волков, представляющий «федеральный штаб» в Москве», — пояснили в СК. Там добавили, что в период с 2014 по 2021 год в состав сообщества вошли Албуров, Шаведдинов, Соболь, Гимади и иные лица, а также руководители и сотрудники штабов в регионах. По данным следствия, для пропаганды преступной деятельности в интернете были созданы сайты Фонда борьбы с коррупцией, «Штабов Навального», а также собственный канал на портале YouTube, использовались и социальные сети Twitter, Instagram, Facebook и другие.

В СК уверены, что противоправная деятельность экстремистского сообщества была направлена на дискредитацию органов госвласти и проводимой ими политики, создание протестного настроения у населения и формирование общественного мнения о необходимости насильственной смены власти, дестабилизацию обстановки в регионах, организацию и проведение протестных акций, перерастающих в массовые беспорядки.

Совершенные преступления

По данным СК, в период с 2014 по 2021 год руководители и участники экстремистского сообщества систематически проводили в российских регионах несогласованные акции, в ходе которых осуществлялись призывы к экстремистской и террористической деятельности, совершались противоправные действия, влекущие нарушение прав и свобод человека и гражданина, причинялся вред общественному порядку и общественной безопасности. Решением Мосгорсуда в этом году ликвидированы Фонд защиты прав граждан, ФБК и запрещена деятельность общественного движения «Штабы Навального» из-за признания их экстремистскими организациями.

Среди преступлений экстремистской направленности в СК назвали создание Навальным и руководство им совместно с Волковым и Ждановым некоммерческой организацией, выполняющей функции иноагента, ФБК и призывы к участию в несогласованных митингах 23 и 31 января, а также 21 апреля 2021 года (ч. 2 ст. 239 УК РФ), размещение Волковым и Ждановым в августе этого года (после принятие судом решения о запрете деятельности ФБК) в интернете видеоролика, в котором они призывали осуществлять финансирование команды Навального путем перечисления денежных средств и криптовалюты (ч. 1 ст. 282.3 УК РФ).

Кроме того, Волков и иные неустановленные сторонники Навального в сети Интернет размещали публикации с призывами к несовершеннолетним об участии 23 января 2021 года в несогласованных митингах (ч. 2 ст. 151.2 УК РФ). Участник «Штаба Навального» Мулюков в Уфе 12 июня 2017 года выступил перед гражданами с призывами к совершению насильственного изменения основ конституционного строя путем проведения революции на территории РФ (ч. 1 ст. 280 УК РФ), еще один участник «федерального «Штаба Навального» в Москве Зеленский в октябре 2020 года разместил в интернете публикации, в которых побуждал к борьбе против существующей государственной власти с использованием насильственных действий (ч. 1 ст. 280 УК РФ).

Соратник Навального из Новосибирска стал фигурантом уголовного дела об экстремистском сообществе

© twitter.com / Вячеслав Гимади

Оппозиционный политик Алексей Навальный и его ближайшие соратники стали фигурантами уголовного дела о создании экстремистского сообщества и участии в нем. В числе подозреваемых оказался юрист из Новосибирска Вячеслав Гимади.

Главное следственное управление СК РФ возбудило уголовное дело о создании и руководстве экстремистским сообществом (ч. 1 ст. 282.1 УК), а также об участии в нем (ч. 2 ст. 282.1 УК). Его фигурантами стали оппозиционный политик Алексей Навальный и его соратники, сообщили в пресс-службе ведомства.

В числе подозреваемых по делу оказался юрист из Новосибирска и глава юридического отдела команды Навального Вячеслав Гимади.

По версии следствия, в 2017 году в 37 регионах России было создано общественное движение «Штабы Навального»*, «куратором и руководителем» которого являлся Леонид Волков.

«В период с 2014 по 2021 годы в состав сообщества вошли [Любовь] Соболь, [Георгий] Албуров, [Руслан] Шаведдинов, [Вячеслав] Гимади и иные лица, а также руководители и сотрудники штабов в регионах», — говорится в сообщении СК.

Оппозиционерам вменили деятельность, направленную «на дискредитацию органов государственной власти, дестабилизацию обстановки в регионах, создание протестного настроения у населения и формирование общественного мнения о необходимости насильственной смены власти, организацию и проведение протестных акций, перерастающих в массовые беспорядки».

«Они будут искать и подбирать разные статьи, чтобы оставить Навального в тюрьме, потому что создание экстремистского сообщества — это очередная тяжелая статья. Вторая цель — запугать всех тех, кто имел отношение к Фонду борьбы с коррупцией* и штабам Навального, чтобы они совсем не высовывались», — сказал «Дождю»** исполнительный директор команды Навального Иван Жданов.

В 2016 году юрист Вячеслав Гимади нашел у депутатов заксобрания Новосибирской области Андрея Каличенко и Ивана Сидоренко земельный участок площадью около 1,8 га, который не был отражен в их декларациях.

*По версии Минюста РФ, являются иностранными агентами. Мосгорсуд также признал их «экстремистскими» организациями по иску прокуратуры.

**По версии Минюста РФ, является СМИ, выполняющим функцию «иностранного агента»

СК завел дело на Навального за создание экстремистского сообщества

Следственный комитет сообщил о возбуждении уголовного дела в отношении Алексея Навального о создании и руководстве экстремистским сообществом. В том же обвиняют его соратников Леонида Волкова и Ивана Жданова, а также «иных лиц».

Любовь Соболь, Георгий Албуров, Рустам Шаветдинов, Вячеслав Гимади, Павел Зеленский, Рустем Мулюков обвиняются в участии в экстремистском сообществе.

Согласно версии СК, «не позднее 2014 года» Навальный, являясь учредителем «Фонда борьбы с коррупцией» (признан иноагентом, также признан экстремистским и ликвидирован на территории РФ, как и НО «Фонд защиты прав граждан»), «с целью осуществления экстремистской деятельности … создал экстремистское сообщество и руководил им». К нему, указывает ведомство, «присоединились Волков и Жданов».

Далее «в целях расширения сферы преступной деятельности» в 2017 году были созданы «Штабы Навального» (признаны экстремистскими и запрещены в РФ), которые курировал Волков, к нему присоединились Соболь, Албуров, Шаведдинов, Гимади «и иные лица, а также руководители и сотрудники штабов в регионах». Следствие считает, что «в целях пропаганды преступной деятельности» в интернете были созданы сайты указанных организаций, а также аккаунты в соцсетях.

Деятельность сообщества, считает СК, «была направлена на дискредитацию органов государственной власти», а также на «дестабилизацию обстановки в регионах» и на «создание протестного настроения у населения», равно как и на «проведение протестных акций, перерастающих в массовые беспорядки».

В пресс-релизе ведомства говорится, что по 2021 год фигуранты дела проводили несогласованные публичные мероприятия, на которых призывали «к экстремистской и террористической деятельности» и в ходе которых «причинялся вред общественному порядку и общественной безопасности».

Читайте также: «Медведев раскритиковал Twitter за рекомендацию подписаться на Навального»

Коммунальное строительство | Инженеры-строители | ВК Гражданская

Муниципальная

Когда ваше сообщество зависит от работы инженера-строителя, вам нужны профессионалы, которые проявят максимальную осторожность и обладают высочайшим уровнем честности. Это наш стандарт. Мы знаем, что наши решения будут влиять на ваше сообщество на десятилетия, и мы всегда будем стремиться к решениям, которые эффективно используют деньги налогоплательщиков как сейчас, так и в будущем.

Планирование

Планирование будущего имеет решающее значение для устойчивости сообщества.Уравновешивание общественных ожиданий, различные приоритеты избранных официальных лиц и финансовые ограничения — все это часть общего процесса планирования и управления активами. Совершенно необходимо, чтобы построенные сейчас инженерные сети служили обществу для будущих поколений.

• Управление активами
• Генеральный план коммунальных предприятий
• Технико-экономическое обоснование
• Исследования надежности
• Смета
• Исследования притока и проникновения
• Анализ служебных мощностей

Коммунальное проектирование и строительство

Команда VK Civil обладает опытом и способностями в проектировании и администрировании строительства систем сбора сточных вод, распределения воды, резервуаров для хранения, насосных станций, объектов ливневой канализации и строительства дорог.

• Планы, спецификации и разрешения
• Смета строительства
• Управление торговыми торгами и контрактами на строительство
• Наблюдение за строительством

Надзор за развитием

Мы проводим экспертизу инженерных планов и предоставляем услуги по наблюдению за строительством для девелоперских проектов от имени наших муниципальных клиентов. Эти проекты включают в себя площади, кондоминиумы, промышленные парки и торговые объекты. Лишь некоторые из известных имен включают торговый центр Byron Center Tanger Outlet Mall, кампус Каледонского университета Давенпортского университета, а также Switch Pyramid и Supernap.

• Обзоры инженерного плана развития
• Обзоры плана дренажа
• Сводные обзоры горнодобывающей промышленности
• Соглашения о разделении затрат с разработчиками
• Дополнительные служебные модули

Администрирование коммунальных предприятий

Мы очень тесно сотрудничаем с муниципальным административным персоналом и операторами инженерных сетей, чтобы помочь им поддерживать максимальную эффективность и ответить на любые вопросы в процессе.

• Служебная административная помощь
• Административные постановления о коммунальных предприятиях
• Тарифы и сборы / Выставление счетов
• Соглашения о межмуниципальных коммунальных услугах
• Планы эксплуатации и технического обслуживания
• Картирование инженерных сетей
• Картографирование ГИС / GPS
• Управление записями

Очистка воды в домашних условиях: малозатратные меры

Med J Armed Force India.2009 июл; 65 (3): 260–263.

VK Agrawal, (Retd)

^* Prof (PSM), Rohilkhand Medical College, Pilibhit Bypass Road, Bareilly-243006

R Bhalwar

⁺ Консультант (PSM), Army Hosp (R&R), Дели Cantt-10

^* Prof (PSM), Медицинский колледж Rohilkhand, Pilibhit Bypass Road, Bareilly-243006

⁺ Консультант (PSM), Army Hosp (R&R), Delhi Cantt-10

Поступило 24 ноября 2005 г. ; Принята в печать 21 сентября 2006 г.

Реферат

Многочисленные исследования показали, что улучшение микробиологического качества воды в домашних условиях путем очистки в месте потребления снижает диарею и другие заболевания, передающиеся через воду. Наиболее перспективными и доступными из технологий очистки бытовой воды являются фильтрация керамическими фильтрами, хлорирование с хранением в импровизированной емкости, солнечная дезинфекция в прозрачных бутылках комбинированным действием УФ-излучения и тепла, термическая дезинфекция (пастеризация) в непрозрачных емкостях с солнечный свет от солнечных батарей или отражателей и комбинированных систем, использующих химическую коагуляцию-флокуляцию, осаждение, фильтрацию и хлорирование.Однако каждая из этих технологий имеет ограничения, и эффективность может быть увеличена путем последовательного использования двух или более систем лечения для улучшения лечения и создания множества препятствий. В частности, после тех обработок, которые не содержат остаточных дезинфицирующих средств, таких как кипячение, солнечная обработка, УФ-дезинфекция с помощью ламп и фильтрация, может следовать хлорирование, чтобы обеспечить многобарьерный подход. На рынке доступны водоочистители, основанные на различных вмешательствах, таких как фильтрация / ультрафильтрация / адсорбция активированным углем / дезинфекция УФ-лучами, которые можно использовать для очистки воды в месте использования.Водоочистители, основанные на единичных вмешательствах, такие как свечные фильтры, фильтры из смолы или ультрафиолетовые лампы, могут использоваться в большинстве мест, куда поступает вода после очистки. Военнослужащие, находящиеся в оперативном движении, могут очищать воду путем фильтрации ткани / смол и дезинфекции хлором или флокулянтами-дезинфектантами.

Ключевые слова: Очистка воды в домашних условиях, недорогие вмешательства, эффективность

Введение

По оценкам, 1,1 миллиарда человек не имеют доступа к улучшенным источникам питьевой воды [1].Потребление небезопасной воды продолжает оставаться одной из основных причин 2,2 миллиона случаев смерти от диарейных болезней ежегодно, в основном среди детей [2]. В настоящее время имеются убедительные доказательства того, что простые, приемлемые и недорогие меры вмешательства на уровне домохозяйства и общины способны значительно улучшить микробиологическое качество воды, хранящейся в домах, и снизить риски диарейных заболеваний [3, 4, 5]. В этом обзоре кандидатные технологии и подходы для очистки воды в домашних условиях исследуются на основе их технической осуществимости, практичности, доступности и эффективности в улучшении микробиологического качества воды и сокращении заболеваний, передаваемых через воду.

Кипячение

Кипячение или нагревание воды эффективно для уничтожения всех классов болезнетворных микроорганизмов, передающихся через воду, и может быть эффективно применено ко всем видам воды, в том числе с высокой мутностью. Хотя кипячение является предпочтительной термической обработкой для загрязненной воды, нагревание до температуры пастеризации (60 ° C) в течение десятков минут уничтожит большинство болезнетворных микроорганизмов, передающихся через воду. Было показано, что даже нагревание до 55 ° C в течение нескольких часов резко снижает количество неспорообразующих бактериальных патогенов, а также многих вирусов и паразитов, включая передаваемые через воду Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia и Entamoeba histolytica [6].

Термическая обработка солнечным излучением

Воду можно нагревать до температуры 55 ° C в прозрачных бутылках, подвергающихся воздействию солнечного света в течение нескольких часов, особенно если бутылка окрашена в черный цвет с одной стороны или находится на темной поверхности, которая собирает и излучает тепло [7]. Этот метод лечения использует как ультрафиолетовое излучение солнечного света, так и тепловое воздействие солнечного света для инактивации переносимых водой микробов. Основным ограничением солнечного отопления является доступность солнечного света, который сильно зависит от сезона и географического положения.Еще одним потенциальным ограничением использования солнечного отопления для дезинфекции воды является определение температуры воды. Было разработано несколько простых и недорогих индикаторов температуры. Одним из самых простых и эффективных является индикатор многоразовой пастеризации воды, основанный на температуре плавления соевого воска.

Солнечная обработка ультрафиолетовыми и тепловыми эффектами

Обработка для контроля переносимых водой микробных загрязнений путем воздействия солнечного света в прозрачных сосудах, которая позволяет сочетать бактерицидные эффекты как ультрафиолетового излучения, так и тепла

также была разработана, оценена и внедрена в практику [ 8, 9].Было описано несколько различных систем солнечной обработки, но одна из технически простых и наиболее экономичных — это система SODIS. Система SODIS состоит из четырех основных этапов; удаление твердых частиц из сильно мутной (> 30 NTU) воды путем отстаивания или фильтрации, помещение воды с низкой мутностью (<30 NTU) в прозрачные пластиковые бутылки, аэрация воды путем сильного встряхивания при контакте с воздухом и подвергание наполненных, аэрированных бутылок полному солнечному свету в течение примерно пяти часов или дольше, если только часть солнечного света.Наблюдалось заметное снижение заболеваемости диарейными заболеваниями и холерой у кенийских детей, употребляющих воду, дезинфицированную солнечными батареями [10].

УФ-дезинфекция с использованием ламп

Дезинфекция питьевой воды УФ-лампами практикуется с начала 20 века [11]. В последние годы к этому методу дезинфекции питьевой воды возобновился интерес из-за его хорошо задокументированной способности широко (> 99,9%) инактивировать двух водных хлор-устойчивых простейших: ооцисты Cryptosporidium parvum и цисты Giardia lamblia.Однако растворенные органические вещества и взвешенные вещества поглощают УФ-излучение или защищают микробы от УФ-излучения, что приводит к более низким доставляемым УФ-дозам и снижению микробной дезинфекции. Кроме того, УФ-излучение не оказывает остаточного эффекта в воде для защиты от загрязнения после обработки.

Волоконно-тканевые и мембранные фильтры

Большинство тканевых и бумажных фильтров имеют размер пор больше, чем диаметр вирусов и бактерий, поэтому удаление этих микробов невелико, если микробы не связаны с более крупными частицами.Однако у некоторых мембранных и волоконных фильтров размер пор достаточно мал для эффективного удаления паразитов (размер пор от одного до нескольких микрометров), бактерий (размер пор 0,1–1 микрометр) и вирусов (размер пор от 0,01 до 0,001 микрометра или ультрафильтры). Бумажные фильтры рекомендованы для удаления шистосом, а фильтры из полиэстера или моноволокна из нейлоновой ткани рекомендованы для удаления циклопов. Такие фильтры успешно используются как на уровне домохозяйства, так и на уровне общины [12].Различные типы ткани сари и нейлоновой сетки можно использовать в один или несколько слоев для удаления из воды зоопланктона и фитопланктона, содержащих холерный вибрион, тем самым снижая их концентрацию от> 95 до> 99% [13].

Пористые керамические фильтры

Большинство современных керамических фильтров имеют форму сосудов или полых цилиндрических «свечей». Вода обычно проходит снаружи свечи внутрь, хотя некоторые фильтры из пористой глины предназначены для фильтрации воды изнутри наружу.Многие коммерчески производимые керамические фильтры пропитаны серебром, чтобы действовать как бактериостатический агент и предотвращать образование биопленки на поверхности фильтра. Однако все фильтры с пористой керамической средой требуют регулярной очистки для удаления накопившегося материала и восстановления нормальной скорости потока. Пористые керамические фильтры могут изготавливаться с различными размерами пор, и большинство современных керамических фильтров, производимых в развитых странах мира, рассчитаны на микронные или субмикронные размеры пор, которые эффективно удаляют бактерии, а также паразитов.Керамические фильтры в различных странах развитого мира были тщательно протестированы на эффективность в снижении различных микробных загрязнителей, переносимых водой, и некоторые из них рассчитаны на удаление не менее 99,9% бактерий, таких как Klebsiella terrigena, 99,9% вирусов, таких как полиовирусы и др. ротавирусов и 99,9% цист лямблий и ооцист Cryptosporidium [14].

Коагуляция и осаждение квасцов и железа

Когда калийные квасцы были оценены для очистки воды в домашних условиях в пригороде в Мьянме путем добавления их в воду в традиционных резервуарах для хранения, фекальное колиформное загрязнение снизилось на 90-98%, и потребители согласились с этим. очищенная вода была высокой [15].В другом исследовании было обнаружено, что квасцы более эффективны в снижении заболеваемости среди членов семей в домохозяйствах, где проводились интервенции (9,6%), чем в контрольных домохозяйствах (17,7%) в зоне, пораженной холерой [16].

Адсорбция древесного угля и активированного угля

Основное применение древесного угля и активированного угля — уменьшение токсичных органических соединений, а также соединений с неприятным вкусом и запахом в воде [17]. Хотя свежий или чистый древесный уголь или активированный уголь будут адсорбировать микробы, в том числе патогены, из воды, растворенные в воде органические вещества быстро занимают места адсорбции, и углерод быстро образует биопленку.Во многих устройствах в месте использования уголь пропитан или смешан с серебром, которое служит бактериостатическим агентом для уменьшения микробной колонизации и контроля микробного размножения в воде продукта.

Ионообменная дезинфекция

Ионообменная дезинфекция в основном выполняется йодом в форме трийодидных или пентайодидных обменных смол. Переносные и пригодные для использования в местах применения йодообменные смолы были разработаны и всесторонне оценены на предмет инактивации патогенов, передающихся через воду, прежде всего в развитых странах.Большинство из них имеют форму стаканов, кувшинов, колонн, через которые проходит вода, так что микробы контактируют с йодом на смоле. Было обнаружено, что применяемые йодные смолы в значительной степени инактивируют вирусы, бактерии и простейших паразитов [18].

Обработка хлором

Хлор — самый доступный, простой и широко используемый агент. Он очень эффективен почти против всех патогенов, передающихся через воду, за исключением ооцист Cryptosporidium parvum и видов микобактерий [19].При дозах несколько мг / л и времени контакта около 30 минут свободный хлор обычно инактивирует> 4 log10 (> 99,99%) кишечных бактерий и вирусов. Для эффективного хлорирования вода не должна быть мутной. Преимущества обработки хлором в том, что она дешевая и дает остаточный эффект.

Комбинированные системы очистки

В Южной Африке были разработаны, оценены и проданы коммерческие таблетки, содержащие хлор и сульфат алюминия, для очистки воды в общинах и домах [20].В целом, комбинированные системы коагуляции-флокуляции и дезинфекции хлором показали большие перспективы в качестве микробиологических очистителей бытовой воды [21]. На рынке доступны водоочистители, основанные на множестве вмешательств, таких как фильтрация / адсорбция активированным углем / дезинфекция УФ-лучами, которые можно использовать для очистки воды на месте использования, но они требуют высоких затрат на установку и обслуживание.

Заключение

обобщает различные бытовые технологии очистки воды на основе их практичности, доступности и эффективности в улучшении микробиологического качества воды, стоимости и ограничений.На рынке доступны водоочистители, основанные на множественных вмешательствах, таких как фильтрация / ультрафильтрация / адсорбция активированным углем / дезинфекция ультрафиолетовыми лучами, которые могут использоваться для очистки воды в точках для использования на предприятиях общественного питания и в частных домах, если качество воды подается на них. мест является неудовлетворительным, в противном случае можно использовать очистители воды, основанные на единичных вмешательствах, такие как свечные фильтры, фильтры из смолы (суракша с нулевым уровнем B) или ультрафиолетовая лампа, поскольку большинство этих мест снабжается водой после очистки военно-инженерными службами / кантонментами.Военнослужащие, находящиеся в оперативном движении, могут очищать воду путем обеззараживания хлором (аквазак).

Таблица 1

Сравнение мероприятий по очистке воды в домашних условиях

Конфликты интересов

Не определены

УВЕДОМЛЕНИЕ

MJAFI рассылается всем офицерам AMC и AD Corps (за исключением нетехнических офицеров) по адресам и номинальным спискам, отправленным единицы.Любой сотрудник, не получающий журнал, может переслать свое имя и адрес в соответствии с форматом, указанным ниже, для включения в список рассылки

Список литературы

Работа: vk.гы. vk.gy — это сообщество и библиотека… | by John Simpson

vk.gy — это сообщество и библиотека информации о группах в жанре «визуальный рок».

Жанр специфичен для Японии и достаточно мал, чтобы информация была разрозненной и недоступной для западной аудитории. Я основал vk.gy, чтобы восполнить этот пробел, одновременно решая проблемы, которые я видел с существующими в настоящее время источниками.

У этого жанра есть особенности, которые делают его менее подходящим для сайтов в стиле Wiki.По этой причине — и просто чтобы подтолкнуть себя — я решил создать собственную CMS для размещения сайта. Серверная часть работает на PHP и SQL, а интерфейсная часть построена на HTML и CSS с улучшениями UI / UX с помощью jQuery и vanilla JS.

Я также управляю сообществом разнообразных международных фанатов через vk.gy и заручился их поддержкой благодаря успешной кампании Patreon.

Вот некоторые из конкретных проблем, с которыми я столкнулся, и функций, которые я создал при сборке vk.gy:

—

## Работа с символами

Артисты этого жанра обычно используют символы, акценты и стилизацию в названиях своих песен, названиях релизов, названиях групп и так далее. В культурном отношении эти декоративные элементы более важны, чем они могли бы быть для западной группы. Таким образом, я хотел, чтобы vk.gy сохранил их.

Проблема с такими символами заключается в том, что их практически невозможно представить одинаково для всех пользователей. Чтобы решить эту проблему, я сохраняю и обслуживаю все страницы в UTF-8 и использую метатеги, чтобы гарантировать, что это кодировка по умолчанию.Кроме того, все нестандартные символы кодируются в объекты HTML перед сохранением в базе данных. (Хотя это увеличивает использование места, но это необходимый компромисс.)

—

## Работа с двумя языками

Поскольку это японский жанр, я хотел сохранить оригинальные имена японских исполнителей, названия песен и т. Д. . Таким образом, все таблицы базы данных состоят из полей «name», «romaji» и «friendly». «Имя» является обязательным полем по умолчанию и относится к оригинальному тексту японского художника.«Ромадзи» означает романизированную версию (японские слова, написанные латинскими буквами), если это необходимо. А «дружественный» — это текст, который будет отображаться в URL-адресе (что гарантирует, что все пользователи могут без проблем получить доступ к URL-адресам), но также может использоваться как своего рода текст-подсказка.

На всем сайте используется настраиваемая функция lang (), которая позволяет мне отображать «имя + ромадзи» в представлении по умолчанию (на английском языке) и просто «имя» в представлении на японском языке. Селектор языка в верхней части окна позволяет пользователям переключаться на японский язык в любое время — механизмом этого является чистый HTML + CSS.Около 50% наших посетителей в данный момент — японцы, и около 70% из них используют японское представление.

—

## Создание базы данных

Весь сайт основан на серверной части SQL. База данных разбита на различные «типы элементов»: одна таблица для артистов, другая для музыкантов и так далее. Все таблицы имеют одинаковую структуру, с полями «name», «romaji» и «friendly», а также с другими общими полями, такими как «date_occurred» или «user_id». В этих таблицах используются похожие имена и структуры, чтобы обеспечить максимальную простоту разработки в будущем.

Каждый элемент в таблице имеет уникальный идентификатор, и все ссылок на сайте используют эти идентификаторы; CMS была разработана так, чтобы было очень сложно ссылаться на несуществующий элемент, что в основном устраняет проблему битых ссылок, которые часто встречаются на сайтах в стиле Wiki. Это дает дополнительное преимущество, гарантируя, что посетителям будет отображаться только самое последнее имя исполнителя — если группа меняет свое имя, все ссылки автоматически указывают на новое имя.

Кроме того, вся информация максимально детализирована.Артисты отделены от музыкантов; концерты проводятся отдельно от концертных залов; музыкальные релизы отделены от песен; и так далее. Для выпусков с несколькими выпусками эти выпуски можно вводить только по отдельности, поэтому различия очевидны. Это помогает избежать проблемы, из-за которой информация может быть скрыта в комментариях на определенной странице, а также помогает защитить сайт в будущем, поскольку в любое время можно создать новые функции, использующие детализированные данные.

—

## Обеспечение качественного ввода данных

UI ​​/ UX CMS оптимизировался на протяжении многих лет, чтобы редакторы могли легко добавлять информацию в единообразном и понятном виде.Поскольку у нас есть редакторы по всему миру, особое внимание было уделено тому, чтобы каждый человек мог набирать только базовые латинские символы, чтобы вносить значимый вклад в работу сайта. Я также уделяю особое внимание уменьшению необходимого количества щелчков и переходов по табуляции, что может раздражать на таких сайтах, как Discogs.com.

По возможности используются динамически заполняемые раскрывающиеся списки и автозаполнение. Для музыкальных релизов (которые могут иметь несколько версий) кнопки позволяют редактору легко дублировать релиз и менять местами треки.Списки треков автоматически ссылаются на ранее выпущенные песни исполнителя и автоматически заполняют поля полным названием песни (что имеет побочный эффект в виде уменьшения количества опечаток).

По возможности используются автоматизированные системы. У артистов есть раздел «биография артиста», который автоматически сканирует каждую запись и присваивает ей метку, например «изменение состава» или «расформирование», но также позволяет пользователю вручную изменить метку. Эти теги используются для сортировки информации и отображения ее в соответствующем виде.Точно так же, когда добавляются предстоящие выпуски или отмечается предстоящее изменение участника, система автоматически сканирует текст и создает сообщение в блоге с новостями. Эти сообщения в блоге затем автоматически публикуются в Twitter и Facebook vk.gy, после чего пользователь может вручную редактировать запись.

«Шипы» взаимодействия с пользователем были максимально уменьшены, чтобы стимулировать совместную работу на сайте. Для японских пользователей — многие из которых привыкли к доскам сообщений только для текста со встроенной анонимностью — на сайте есть возможность оставлять анонимные комментарии (которые должны быть одобрены редакторами, прежде чем они появятся для всех пользователей).Таким образом, они могут предоставлять информацию, не отговариваясь от необходимых учетных записей пользователей.

—

## Простая регистрация

Кажется, что у каждого человека миллион аккаунтов на разных сайтах. Таким образом, я сделал все возможное, чтобы сделать регистрацию максимально простой и полезной, но не навязчивой. Когда вы оставляете анонимный комментарий, вам предлагается возможность подписаться позже. Пользователям разрешается регистрироваться только с помощью имени пользователя и пароля, а затем предлагается возможность добавить адрес электронной почты, если они захотят.

Зарегистрированным пользователям предоставляется несколько специальных возможностей. Они могут «собирать» релизы и легко отображать список всех принадлежащих им вещей. Они могут пометить товары как «разыскиваемые» или «для продажи». Они могут оценивать релизы и отмечать релизы и исполнителей.

Одной из наиболее успешных функций, которая увеличила вовлеченность на 50%, является система «аватар». Эта система состоит из базового лица с разными стилями прически, вариантами макияжа и украшениями, которые подражают различным музыкантам в этом жанре.Аватары обслуживаются через SVG и отображаются по всему сайту, что позволяет пользователю представлять себя индивидуально.

—

## Запуск кампании Patreon

Когда vk.gy вышел из стадии бета-тестирования, я решил запустить кампанию Patreon в надежде, что сайт окупится.

Перед запуском кампании я потратил время на изучение демографии. Таким образом, я выбрал два уровня: уровень 1 доллар в месяц и уровень 5 долларов в месяц.

Условно говоря, на 5 долларов в месяц больше, чем в среднем для уровня Patreon.Однако я знал, что люди, обещавшие любую сумму, скорее всего, были бы взрослыми, которые были финансово стабильными, для которых 1 доллар против 5 не так уж и важен. Я также знал, что в целом я, скорее всего, получу небольшое количество обещаний — так как сам фандом довольно мал — и поэтому я стремился к количеству, которое гарантировало бы успех при условии небольшого минимального обещания.

Другая часть запуска успешной кампании Patreon — получение стоящих наград. На этапе исследования я обнаружил, что фанаты постоянно хотят чувствовать себя «причастными».«Фанаты, которые больше всего вовлечены в сообщества, — это те, кто публикует новости, публикует обзоры музыки и так далее. Я подбирал свои награды соответственно.

Те, кто вносит залог в размере 1 доллара в месяц, указаны на первой странице веб-сайта и получают личную благодарность. Тем, кто вносит залог в размере 5 долларов в месяц, предоставляются дополнительные привилегии на сайте через VIP-аккаунт. Рядом с их именем пользователя отображается «VIP», чтобы другие пользователи знали, что они дали обещание. Им предоставляется доступ к эксклюзивному блогу разработчиков (который основан на сообщениях о фиксации в Git), что позволяет им видеть ежедневные обновления.У них также есть доступ к эксклюзивному каналу разработки Discord, где они могут оставлять прямые отзывы и запрашивать функции.

Кампания Patreon оказалась более успешной, чем ожидалось, и достигла своей цели по полному финансированию сайта в течение первого месяца. В настоящее время у нас есть сторонники примерно в 5 раз больше, чем я рассчитал.

—

vk.gy находится в активной разработке. Я стремлюсь постоянно делать сайт быстрее, легче и доступнее для японских пользователей.Я все еще работаю в основном над PHP / SQL для разработки новых функций, в то время как мой новый соразработчик представляет новые функции JS.

Как доехать до V.K.Jewellers в Delhi на автобусе или метро

Общественный транспорт до V.K.Jewellers в Дели

Не знаете, как доехать до V.K.Jewellers в Delhi, Индия? Moovit поможет вам найти лучший способ добраться до V.K.Jewellers от ближайшей остановки общественного транспорта, используя пошаговые инструкции.

Moovit предоставляет бесплатные карты и маршруты в реальном времени, которые помогут вам сориентироваться в вашем городе. Открывайте расписания, поездки, часы работы, и узнайте, сколько займет дорога до V.K.Jewellers с учетом данных Реального Времени.

Ищете остановку или станцию ​​около V.K.Jewellers? Проверьте список ближайших остановок к пункту назначения: Гурудвара Викаспури; Оксфордская школа; Джей Блок Викас Пури; Джанакпури Запад.

Вы можете доехать до V.K.Jewellers на автобусе или метро. У этих линий и маршрутов есть остановки поблизости: Автобус: 153, 793, 793STL, 871, 882A, 883, ML-26 Метро: BLUE LINE, MAGENTA LINE

Хотите узнать, есть ли другой маршрут, который приведет вас туда раньше? Moovit поможет вам найти альтернативные маршруты или время.Получите инструкции, как легко доехать до или от V.K.Jewellers с помощью приложения или сайте Moovit.

С нами добраться до V.K.Jewellers проще простого, поэтому более 930 млн. Пользователей, включая жителей Дели, доверяют Moovit как лучшему транспортному приложению. Вам не нужно загружать отдельное приложение для автобуса или поезд. Moovit — ваше универсальное транспортное приложение, которое поможет вам узнать самое лучшее из доступных расписаний автобусов и поездов.

Для получения информации о ценах на автобус и метро, ​​стоимости и стоимости проезда до В.K.Jewellers, проверьте приложение Moovit.

Государственный министр иностранных дел Индии В.К. Сингх в Северной Корее

Индия, подкрепленная недавними мирными сигналами из Северной Кореи, пытается укрепить связи с затворническим режимом.

Государственный министр иностранных дел Индии В.К. Сингх прибыл в Пхеньян с делегацией официальных лиц во вторник для двухдневного пребывания, где встретился с рядом высокопоставленных официальных лиц, таких как министр иностранных дел Ри Йонг Хо и министр культуры Пак Чун Нам.

Это был первый визит на высоком уровне индийского министра в страну-изгой почти за два десятилетия.

Северокорейский лидер Ким Чен Ын общается с учеными и техническими специалистами Академии оборонных наук КНДР после испытательного запуска межконтинентальной баллистической ракеты Hwasong-14 на этой недатированной фотографии, опубликованной Центральным информационным агентством Северной Кореи (KCNA) в Пхеньяне. 5 июля 2017 г.

KCNA | Reuters

«Теперь, когда обстановка вокруг Северной Кореи меняется, Индия может почувствовать, что это подходящий момент, чтобы обратиться к нам, возможно, в ожидании открытия страны», — сказал Харш Пант, уважаемый научный сотрудник и руководитель стратегических исследований в New Базирующийся в Дели аналитический центр Observer Research Foundation.

Несмотря на некоторые сбои в международных усилиях по ограничению ядерного оружия Северной Кореи — администрация Ким Чен Ына в среду пригрозила отказаться от встречи 12 июня с президентом Дональдом Трампом — напряженность на Корейском полуострове значительно снизилась после прошлогодних регулярных ракетных запусков.

И теперь, когда Белый дом обращается к Киму — госсекретарь Майк Помпео в минувшие выходные упомянул о потенциале частных инвестиций в слаборазвитый штат — Нью-Дели, вероятно, захочет последовать его примеру.

«Визит, возможно, был вызван недавними событиями в отношениях США и Северной Кореи», — сказал Амит Каушиш, бывший советник Министерства обороны Индии и нынешний партнер юридической фирмы Dua Associates.

Но это не значит, что Индия хочет участвовать в ядерных переговорах.

Скорее, «цель визита, похоже, состоит в том, чтобы изучить возможность перезагрузки взаимоотношений в контексте политики Индии« Закон Восток »», — заявил Каушиш, имея в виду внешнеполитическую инициативу премьер-министра Нарендры Моди по укреплению отношений с азиатскими соседями.

Нью-Дели может рассматривать этот визит как средство позиционирования на переднем крае, если Северная Корея стабилизируется и присоединится к международному сообществу, сказал Пант.

Возобновление старых отношений

До того, как Моди приостановил основную часть двусторонней торговли с Северной Кореей в 2017 году на фоне международных санкций в отношении изолированной страны, эти двое десятилетиями поддерживали дружеские дипломатические, торговые и экономические отношения.

«В конце 2016 и начале 2017 года даже поступали сообщения о том, что Индия была третьим по величине торговым партнером Северной Кореи, хотя эти цифры не учитывали существенную незаконную или необъявленную торговлю с участием Китая и России», — сказал Дхрува Джайшанкар, научный сотрудник по внешней политике. в Брукингсе, Индия.

Индия также имеет посольство в Пхеньяне, сопротивляясь давлению Вашингтона в прошлом году с целью разорвать все связи с правительством Кима.

Северная Корея, являющаяся третьей по величине экономикой Азии, неразрывно связана с проблемами безопасности и террора вокруг своего конкурента — Пакистана, — пояснил Пант.

Исламабад уже давно снабжал Пхеньян ядерными технологиями в рамках сети Абдул Кадир Хана, отца ядерной программы Пакистана, который признался, что делится своими планами с такими странами, как Ливия, Иран и Северная Корея.

Определение численности бактерий и сообществ в системе поения сосков каскадных клеточных птичников

Несушек

Исследование было одобрено Комитетом по уходу и использованию животных (IACUC) Аньхойской академии сельскохозяйственных наук под номером одобрения A11- CS06. Все протоколы обращения с животными и отбора проб проводились в соответствии с соответствующими руководящими принципами и правилами. Эксперимент проводился в закрытом птичнике с 8 перекрывающимися ярусами клеток коммерческой фермы (Anhui Sundaily Village Ecological Food Co., Ltd., Тонглин, Китай) летом (с 06.04.2019 по 13.08.2019). Птичник был разделен на два этажа (один над другим с 4 перекрывающимися ярусами клеток на каждом этаже) с проходом из стальной сетки посередине, и содержалось 50 000 римских коммерческих кур-несушек. В птичнике-несушке было 4 клетки-колонны, длина — 73,0 м, ширина — 16,0 м, высота — 6,3 м с большой осью север-юг (рис. 3а). В одной колонне на одном ярусе было 135 клеток. В птичнике-несушке имелась продольная механическая вентиляция (вытяжные вентиляторы и охлаждающая подставка испарения), а также автоматическая подача, транспортировка навоза и водопроводы.Все куры имели свободный доступ к корму и воде.

Вид домика и схема участков мониторинга. ( a ) Дом несушек, вид сверху; ( b ) вид сбоку на курятник; ( c ) водопроводная труба и V-образный желоб внутри клетки.

Отбор проб

Когда цыплятам исполнился 371 день, в общей сложности было выбрано 24 точки наблюдения с передней (13-я клетка), средней (73-я клетка) и задней (135-я клетка) сторон на 1-й и 3-й сторонах. , 5-й и 7-й ярусы соответственно в двух клетях восточной колонны в продольном направлении (рис.3а, б). Пробы воды из водопровода в каждой точке мониторинга отбирались непосредственно трубкой с завинчивающейся крышкой, а пробы воды из V-образного желоба (рис. 3c) извлекались шприцем и затем вводились в трубку с завинчивающейся крышкой. Все пробы воды отбирались каждые две недели, объем сбора составлял 50 мл. Если воды внутри V-образного желоба было недостаточно, для протирания желоба использовали стерильный тампон, который затем переносили в пробирку с завинчивающейся крышкой, в которую добавляли 50 мл воды DEPC. До анализа образцы хранили при -4 ° C.При этом одновременно регистрировались температура и влажность в точках мониторинга (дополнительная таблица S3). Все материалы для отбора проб автоклавировали за день до использования.

Экстракция ДНК и ПЦР-амплификация 16S рРНК

Собранные образцы воды фильтровали через 0,22 мкм гидрофильную мембрану из ПВДФ (поливинилиденфторида). Затем мембрану фильтра переносили в центрифужную пробирку на 2 мл и элюировали 1 мл воды DEPC. Бактериальную геномную ДНК экстрагировали из элюата с использованием набора HiPure Water DNA Kit (Magen, Гуанчжоу, Китай) в соответствии с протоколами производителя.Гипервариабельные области V4-V5 16S рРНК были амплифицированы с помощью ПЦР из геномной ДНК микробов с использованием следующих универсальных праймеров V515F (5’-GTGCCAGCMGCCGCGG-3 ’) и V907R (5’-CCGTCAATTCMTTTRAGTTT-3’). Реакции ПЦР проводили в реакционной системе объемом 20 мкл, содержащей 0,8 мкл каждого праймера, 10 нг матричной ДНК, 4 мкл 5-кратного буфера FastPfu, 2 мкл 2,5 мМ dNTP и 0,4 мкл полимеразы FastPfu. Параметры термоциклирования были следующими: начальная денатурация 2 мин при 95 ° C; 30 циклов денатурации при 95 ° C в течение 30 с, отжига при 61 ° C в течение 30 с и удлинения при 72 ° C в течение 45 с; и окончательное удлинение при 72 ° C в течение 10 мин.Ампликоны объединяли, очищали и затем определяли количественно с использованием прибора NanoDrop 2000 UV-vis (Thermo Scientific, Wilmington, DE, USA).

Приготовление стандарта плазмиды

Стандарт плазмиды для qRT-PCR (количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени) конструировали следующим образом: в соответствии с положением амплификации универсальных праймеров бактериальной 16S рДНК (515-F / 907-R) , последовательность 412 п.н. из положений 515–926 рДНК Escherichia coli 16S была вставлена ​​в вектор клонирования pUC57 (стандарт плазмиды в этом эксперименте был получен путем синтеза гена), и полученная рекомбинантная стандартная плазмида была обозначена pUC57-16S рДНК .Общая длина рДНК pUC57-16S составляла 3122 п.н., а концентрация экстрагированной плазмиды составляла 142,93 нг / мкл. Число копий рДНК pUC57-16S составляло 4,17 × 10 ¹⁰ копий / мкл. Стандарт плазмиды разбавляли бидистиллированной водой до 4,17 × 10 ⁹ ~ 4,17 × 10 ³ копий / мкл и использовали 7 концентраций для построения стандартной кривой.

qRT-PCR

Абсолютное количественное определение с qRT-PCR использовали для определения WBCN образцов. QRT-PCR выполняли в конечном реакционном объеме 20 мкл, содержащем 0.5 мкл каждого праймера, 1 мкл матричной ДНК, 10 мкл 2 × TB Green Premix Ex Taq II и 8 мкл бидистиллированной воды с набором SYBR® Green PCR Master Mix (TaKaRa, Осака, Япония) в CFX96 Real -Временная система обнаружения ПЦР (Bio-Rad, Геркулес, Калифорния, США) с использованием следующего протокола: начальная денатурация в течение 30 секунд при 94 ° C, затем 40 циклов денатурации при 94 ° C в течение 5 секунд и отжиг / удлинение при 61 ° C в течение 50 с. Все реакции были выполнены в трех экземплярах для каждого образца.

Секвенирование 16S рРНК и биоинформатический анализ

Секвенирование следующего поколения было выполнено с помощью системы Illumina HiSeq 2500 PE250 компании Gene Denovo Biotechnology Co., Ltd (Гуанчжоу, Китай) для исследования бактериального сообщества проб воды из V-образных желобов. Качественную фильтрацию и анализ данных последовательности гена 16S рРНК выполняли с помощью QIIME (V 1.7.0), как описано ранее ³² . Последовательности высокого качества были сгруппированы в OTU, определенные с 97% -ным сходством, с использованием конвейера UPARSE (версия 9.2.64) ³³ . Эти OTU применялись для анализа разнообразия (Шеннон и Симпсон), богатства (ACE и Chao) и анализа кривой разрежения с использованием MOTHUR ³⁴ .Таксономическое присвоение ОТЕ, которые достигли уровня сходства 97%, было выполнено с использованием QIIME по сравнению с базами данных SILVA (http://www.arb-silva.de) ³⁵ .

Всего было получено 1 746 303 эффективных считывания из 24 проб воды (по шесть из V-образных желобов V1, V3, V5 и V7, которые были отнесены к 1, 3, 5 и 7 уровням). Эти последовательности включали в среднем 72 762 ± 5 985 прочтений на образец воды, а средняя длина качественных последовательностей составляла 438 ± 49 п.н. (Таблица 2).Большинство кривых разрежения для каждого образца приближались к плато насыщения (рис. 4а), что указывает на то, что образец имел достаточный охват последовательности, чтобы точно описать бактериальный состав каждой группы. Операционные таксономические единицы (OTU) были сгруппированы с 97% идентичностью последовательностей в разных выборках, и среднее количество OTU для каждой группы, обнаруженной нашим анализом, составило 1026, из которых 152, 113, 119 и 118 были уникальными для V1, V3, V5 и V7 соответственно (рис. 4б). Бактериальное богатство на основе OTU оценивалось методами ACE и Chao, а бактериальное разнообразие определялось с помощью метода Шеннона (таблица 2).

Информация об операционных таксономических единицах (OTU). ( a ) Анализ разреженности различных групп. ( b ) Диаграмма Венна, показывающая распределение OTU среди различных групп уровней. V1, V3, V5 и V7 представляют пробы воды из V-образного желоба 1-го, 3-го, 5-го и 7-го яруса соответственно.

Статистический анализ

Данные были подвергнуты дисперсионному анализу (ANOVA) с использованием команды общей линейной модели (GLM) в SAS версии 9.3 статистическое программное обеспечение (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США). Множественное сравнение Тьюки использовалось для проверки значимости различий между средними значениями групп; значимость была заявлена ​​на уровне P <0,05. Все данные представлены как среднее значение и стандартная ошибка среднего, а температура, влажность и общее число копий рДНК 16S бактериального генома на 1-м, 3-м, 5-м и 7-м ярусах клетки были средними значениями спереди, посередине.