Тнт м2: TNT Продавец нетканых материалов, Оптовая торговля тканевыми материалами TNT, Фабрика тканей TNT

Содержание

THT/WALL — Sodeca

Вытяжные вентиляторы настенного монтажа с динамической системой нагнетания и заслонкой с электроприводом для отведения дыма при пожарах (предел огнестойкости 400 °C/2 ч и 300 °C/2 ч)

Вытяжные вентиляторы настенного монтажа с динамической системой нагнетания и системой открытия люка с помощью электропривода, подсоединяемые к вытяжному воздуховоду. Специальная конструкция позволяет быстро и эффективно отводить вредные газы и дым в случае пожара. Подходят для монтажа в промышленных зданиях, складских помещениях и любых других типах зданий. В комплекте соответствуют стандарту EN-12101-3, что подтверждается сертификатами F-400 и F-300. Могут применяться для наружной вентиляции.

Вентилятор:
• Кронштейн для монтажа на стене и опорное кольцо для правильной и простой установки.
• С сертификатом F-400 (номер 0370-CPR-2823) и F-300 (номер 0370-CPR-0973).
• Трубчатый кожух изготовлен из листовой стали с противокоррозийным покрытием на основе полиэфирной смолы.
• Роторы с изменяемым углом атаки, изготовленные из литого алюминия.
• Направление воздуха двигатель-крыльчатка.

Люк из экструдированного алюминия:
• Исключительно прочная конструкция, способная выдержать сильные изменения погодных условий.
• Разработан для обеспечения водонепроницаемости.
• Алюминиевый профиль с участком температурного моста.
• Центральный потолок и конструкция с высокоэффективной теплоизоляцией.
• Теплостойкость сборной конструкции менее 0,89 Вт/м2·К.
• Концевые переключатели для обоих положений (открытого и закрытого).
• Система открытия вручную.

Двигатель:
• Электродвигатели класса Н для непрерывной работы S1 и аварийного использования S2. С шариковыми подшипниками, защитой IP55 и 1 или 2 скоростями в зависимости от модели.
• Электродвигатели с классом энергоэффективности IE3.
• Трехфазный электродвигатель на 230/400 В, 50 Гц (до 3 кВт), и 400/690 В, 50 Гц (мощностью более 3 кВт).
• Максимальная температура перемещаемого воздуха: режим непрерывной работы S1 при температуре от −25 до +40 °C, также подходит для теплого климата с температурой до 50 °C. Режим S2 при температурах 300 °C/2 ч, 400 °C/2 ч.

Привод:
• Надежность более 11 000 двойных циклов.
• Напряжение питания: 230 В пер. тока, 50 Гц.
• Рабочая температура: от −25 до +60 °C.

Финишная обработка створки:
• Антикоррозионное из экструдированного алюминия.
• В качестве стандарта поставляется в цвете RAL7016. Может поставляться по запросу в любом другом цвете по каталогу RAL.

Лучшее изготовление нетканой ткани Tnt Водостойкое покрытие стола

Преимущества компании
1. Нетканые изделия Rayson разработаны для одноразового, многоразового и постоянного использования. Вследствие его различных качественных признаков предоставленное нетканое полотно высоко ценится клиентами нетонового луча, ruixin, enviro клиентами.
2. Сервисная служба Foshan Rayson Non-woven Co., Ltd. всегда работает на профессиональном уровне. Нетканые изделия, которые предлагает Rayson, имеют широкий спектр применения
3. Некоторые из ключевых особенностей этой ткани заключаются в том, что она очень экологична, абсолютно нетоксична, обладает антибактериальными свойствами, прочна и эластична, а также очень легка, а также очень эффективна в качестве водоотталкивающего средства для сохранения влаги от содержимого, хранящегося внутри. Доказано, что различное оборудование из нетканой скатерти, полипропиленового нетканого материала имеет стабильное качество.
4. Тщательно проверен на отсутствие дефектов. Нетканое полотно Rayson изготовлено преданной, хорошо обученной рабочей силой
5. нетканое полотно все чаще используется в нетканых полипропиленовых полотнах из-за его уникальных преимуществ. Проверенный на различных качественных параметрах, предлагаемая ткань лишена любого недостатка

Области применения нашей нетканой ткани PP:

(1) Банкетные столы для домашних вечеринок или вечеринок на открытом воздухе.

(2) Рестораны, кафе, школьные столовые, гостиницы или другие места общественного питания.

Не сплетенный стол


Товар: Нетканая скатерть
Предмет номер.: RS-TC22-WR0001
Материал:
PP спанбонд нетканый материал
Техника: Spunboned
Шаблон: Простой, печатный, водонепроницаемый
Вес: От 38 до 100 мг
Размер в кусках: 100 х 100 см, 120 х 120 см, 140 х 140 см, 150 х 150 см
Размер в рулонах: 1,0 х 8 м, 1,2 х 12 м, 1,4 х 20 м
Форма: Квадратный, круглый
Цвета: Доступны разные цвета (Pantone соответствует или настроен)
Заявка: Вечеринки, свадьбы, банкеты, ресторан, гостиница, больница и т. Д.
MOQ: 1500кг / цвет
Образец: Бесплатный образец с грузом собирать
Сертификат: SGS, OEKOTEX, AZO FREE
Порт погрузки: Шэньчжэнь, гуанчжоу, фошань
Условия доставки: FOB, CIF, CFR


ФУНКЦИИ

Высокое качество: стабильная однородность, достаточный вес
Мягкие ощущения, экологически чистые, пригодные для переработки, дышащие
Антибактериальные, нетоксичные, не раздражающие
Хорошая прочность и удлинение


Точное измерение

ПРИЛОЖЕНИЕ

НАШ СЕРВИС

запрос

Разумное предложение будет отправлено вам в течение 12 часов после его получения.

Образец

Бесплатный образец будет отправлен для проверки качества с доставкой груза.

Контроль качества

100% строгие процедуры тестирования и контроля качества перед отправкой.

Срок поставки

Мы можем обеспечить своевременную доставку для каждого заказа.

Условия оплаты

T / T, 30% депозита, 70% баланс оплаты против BL копию или LC в виде.

Послепродажное обслуживание

Мы сделаем улучшения от предложений наших клиентов по ценам и продуктам.

* OEM и ODM приемлемы

РАСШИРЕННОЕ ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ОБОРУДОВАНИЕ

 

ДЕТАЛИ УПАКОВКИ


НАШИ ПРЕИМУЩЕСТВА

Пригнана 100% девственная пп.

7 современных линий по производству нетканого полипропиленового спанбонд шириной 2, 2,4 и 3,2 метра. Наша способность поставки может быть 1500 тонн в месяц.

6 автоматических режущих машин для нетканой скатерти и 2 сложенные машины, которые могут сделать скатерть в маленьких рулонах.

OEKO-TEX® Стандарт 100

Безопасность покупок — улучшение

OEKO-TEX® Standard 100 — это независимая система испытаний и сертификации текстильного сырья, промежуточных и конечных продуктов на всех этапах производства. Примеры предметов, подлежащих сертификации: все виды одежды, домашний текстиль и домашний текстиль, постельное белье, предметы из махровой ткани, текстильные игрушки и многое другое.


Особенности компании
1. rayon nonwoven, ruixin, enviro специализируется на производстве нетканой скатерти с высоким качеством и доступной ценой.
2. Беда — это величайшая слава. rayon nonwoven, ruixin, enviro предлагает широкий ассортимент нетканых материалов, нетканых материалов, полипропиленовых нетканых материалов по разумной цене для клиентов со всего мира. Пожалуйста свяжитесь с нами!
3. rayon nonwoven, ruixin, enviro фокусируется на постоянных технологических инновациях для улучшения продуктов и услуг. Контакты!

Roomble.com — Все о дизайне, декоре, архитектуре и интерьерах

Офис

Стеклянные стены, неоновые числа

Стойка администратора

Вид на переговорную комнату

Переговорная, деревянные стулья

Комната отдыха

Настольный теннис

Кухня/столовая

Столовая зона, холодильники

Столовая зона — пуфики

столовая зона — шкафчики и столики

Кабинет

Кабинет — переговоров

Кабинет — белая мебель, круглый стол

Кабинет — маленькая переговорная

Кабинет — белый стол, панорамные окна

Кабинет — стеклянные стены

Прочее

Коридор — картина, диванчик

Коридор — на стенах инсталляции запоминающиеся кадры

Коридор — с рисунками на стенах

Студия звукозаписи

Студия обработки

Туалет

Туалет — белый кафель, панорамное зеркало

Туалет — умывальники

Туалет — черные двери

Прихожая

Входная группа

Матрас Нетканый материал Производители полипропиленовой ткани

Матрас флизелиновый квилтинг TNT Fabric 210см

Модель SW-FURNITURE001
Марка SYNWIN
Место происхождения Китай
Вес  популярный вес 40 г / кв.
м, 15 г / кв.м, 30 г / кв.м или сокращенный
Сертификат   SGS, IKEA, Oeko-tex, биосовместимость
Применение

за Мебель , матрас, квилтинг и т. Д.

Характерная черта Антистатический, пригодный для повторного использования, воздухопроницаемый, хорошая прочность и удлинение
Стиль кунжут, квадрат, цветок, рельефный узор  
Нетканая техника спанбонд
Материал   100% полипропилен
Тип поставки сделать на заказ
цвет популярный цвет белый, бежевый, серый или индивидуальный
размер 210 см x 400 м, 230 м x 300 м или индивидуально
MOQ 1000кг
Цена FOB 2,3–2,8 доллара США за кг или другое
Доступен для продажи 100тонн / день
Упаковка рулон упакован по 2 » или 3 » бумажная трубка внутри и полиэтиленовый пакет снаружи
Срок поставки 20 дней
Условия оплаты TT
Порт погрузки
FOSHAN / GUAGNZHOU / SHENZHEN

Буран 15ТРВ ТНТ · АВТОКОМ

Назначение

Модули пожаротушения тонкораспыленной водой «Буран 15ТРВ ТНТ» модификаций «Буран 15ТРВ ТНТ2., «Буран 15ТРВ ТНТ4», «Буран 15ТРВ ТНТ6» предназначены для тушения пожаров классов А, В, а также пожаров, возникающих в помещениях с кабелями, электроустановками и электрооборудованием, находящимися под напряжением до 1000 В.

 

Модули пожаротушения «Буран-15ТРВ ТНТ» всех модификаций относятся к классу стационарных огнетушителей. Используются в составе автоматических установок тушения пожаров – системах автоматического пожаротушения – для защиты моторных и багажных отсеков автомобилей, большегрузной и дорожно-транспортной автотехники, железнодорожных дизель–генераторов, локомотивов и других самоходных транспортных средств, прицепов и т.п. Отдельно модули в комплекте с дистанционными устройствами пуска могут использоваться как автономные установки для тушения локальных очагов возгорания в небольших объемах.

Технические характеристики

Защищаемая площадь, м2 (зависит от высоты установки и расположения распылителя): 4,5 — 19,6
Время срабатывания (инерционность), с, не более: 2
Продолжительность действия, с, не более: 3
Температура эксплуатации: -40°С… +95°С
Вместимость корпуса, л: 15,1
Объём огнетушащего вещества, л: 13,6
Масса огнетушащего вещества, кг: 16,6
Огнетушащее вещество: огнетушащая жидкость АК43
Масса заправленного модуля, кг: 25,0
Масса пустого модуля, кг: 8,4
Габаритные размеры, мм: см. Рис. 1
Ресурс срабатываний (количество срабатываний за время эксплуатации модуля), раз, не более: 5
Коэффициент вероятности безотказной работы, не менее: 0,95
Срок службы генератора: 10 лет с даты продажи

 

 

Исполнение

1. «Буран 15ТРВ ТНТ2.5» – настенного крепления с выводом из модуля под трубную разводку,

транспортного исполнения и шестью распылителями «ТРВ-2.5»,
с высотой установки распылителей до 2,5 м.
2. «Буран 15ТРВ ТНТ4» – настенного крепления с выводом из модуля под трубную разводку,

транспортного исполнения и распылителем «ТРВ-4»,
с высотой установки распылителя до 3 м.
3. «Буран 15ТРВ ТНТ6» – настенного крепления с выводом из модуля под трубную разводку,

транспортного исполнения и распылителем «ТРВ-6»,
с высотой установки распылителя до 4 м.

 

В модификациях модулей с одним распылителем «Буран 15ТРВ ТНТ6», «Буран 15ТРВ ТНТ4» предусмотрена возможность размещения распылителей под различным углом к вертикальной оси, для чего предлагается использовать специальное устройство направленной подачи ОТВ.

Комплект поставки

Модуль — 1 шт.
Концентрат жидкости огнетушащей АК43 — 7,15 кг
Распылитель «ТРВ-2,5» (для модификации «Буран 15ТРВ ТНТ2.5») – 6 шт.
Распылитель «ТРВ-4» (для модификации «Буран 15ТРВ ТНТ4») – 1 шт.
Распылитель «ТРВ-6» (для модификации «Буран 15ТРВ ТНТ6») – 1 шт.
Паспорт и руководство по эксплуатации – 1 шт.
Упаковка — 1 шт.

 

Устройство направленной подачи ОТВ в основной комплект поставки не входит, приобретается отдельно как дополнительная опция.

 

Подробная информация о технических характеристиках, комплектации и устройстве модификаций модулей, принципе действия, способе монтажа и пр. указана в паспорте изделия.

 

Транспортирование модулей осуществляется всеми видами транспорта на любые расстояния в соответствии с «Правилами перевозки грузов…», действующими на соответствующем виде транспорта. Транспортирование модулей воздушным транспортом допускается только в герметичных отсеках самолётов при соблюдении требований перевозки опасных грузов по классу 9.

 

Видео испытаний — Испытательный полигон предприятия «Эпотос-К», г. Кирово-Чепецк, 2014

 

 

TNT запускает рейс грузовых авиаперевозок между Льежем и Венецией


События в российской логистике

18 декабря 2014 г.

Амстердам, 17 декабря 2014 – Компания TNT запускает новый рейс грузовых авиаперевозок между Венецией и авиационным хабом TNT в Льеже (Бельгия). Боинг 737-400 будет осуществлять перевозки пять дней в неделю. Подключение Венеции к международной авиационной сети TNT даст преимущества импортерам и экспортерам, ведущим бизнес с компаниями на северо-востоке Италии – нововведение позволяет доставлять грузы на следующий день после забора, а также осуществлять поздний забор отправлений.

   В регионе Венето, столицей которого является Венеция, находится большое количество экспортно-ориентированных компаний. Благодаря новому воздушному сообщению TNT расширяет своей сервис для клиентов в Центральной Европе.  

   Утренний рейс из Льежа прибывает в аэропорт Венеции имени Марко Поло в 06:00 и далее следует в Любляну (Словения), после чего возвращается в Льеж. Также пять еженедельных рейсов, следующих из Афин в Льеж, будут совершать посадку в Венеции. Они будут отправляться из Венеции в 23:00 – что является преимуществом для клиентов, которым необходим поздний забор груза и доставка на следующий день.

   Чтобы обеспечить наилучшую интеграцию между авиа- и автоперевозками, TNT разместила воздушный терминал в существующем депо TNT в Марконе недалеко от Венеции. Терминал сертифицирован Ассоциацией защиты перевозимых грузов TAPA (Transport Asset Protection Association) и может обрабатывать до 10 грузовых авиаконтейнеров (или укрупненных грузовых единиц) весом 2 т каждый. Депо TNT в Марконе, открытое в 2013 году, оснащено современным оборудованием для автоматического сканирования и сортировки. С февраля 2015 года терминал и депо начнут использовать новейшее полностью автоматизированное оборудование, которое сократит время сортировки экспортных грузов на два часа. Такое оборудование уже устанавливается во всех депо TNT в Италии.

   Компания TNT представлена в Венеции с 1984 года. В депо в Марконе работает 90 сотрудников, а его площадь составляет 3,776 м2. Из депо отправления доставляют 26 автомобилей и 6 моторных лодок «мототопи», которые курсируют по лагуне и каналам в историческом центре Венеции. Терминал и депо будут работать как единый многофункциональный транспортный хаб.

правила оформления и особенности подбора стиля

898 Просмотров ,

Для того чтобы создать дизайн гостиной 17 кв м, можно использовать широкий ассортимент стилистических решений и вариантов оформления помещения. Комната площадью 17 м2 открывает простор для фантазии дизайнера. Достаточно большая площадь будет актуальна для создания как минималистичного интерьера, так и классической обстановки, богатой на различные детали, декор и украшения.

Основные особенности, на которые нужно обращать внимание

При работе с гостиной площадью 17 м2 все начинается с создания концепции интерьера и проработки отдельных важных деталей. Так, на первый план выходят следующие параметры:

  • планировка помещения;
  • высота потолков;
  • тип и расположение оконных конструкций;
  • конфигурация комнаты: угловая, тупиковая, проходная и т. д.

Так, для помещений, имеющих неправильную или сложную планировку, к примеру, для чрезвычайно вытянутых или же расположенных в форме буквы Г и другим необычным образом, в первую очередь потребуется уравновесить симметрию комнаты. Это улучшит эстетическое восприятие и позволит реализовать стилистические и практические решения без серьезных доработок. Подходить к оформлению любого помещения стоит в индивидуальном порядке и с учетом его достоинств и недостатков, способных в дальнейшем повлиять на восприятие эстетики интерьера.


Варианты зонирования помещения

Площадь в 17 м2 достаточна для того, чтобы объединить гостиную с кабинетом или даже спальней, если речь идет об однокомнатной квартире. Особенно эффектно подобное разделение производится в вытянутых помещениях прямоугольной формы, где длина в два и более раза превосходит ширину. В таком случае достаточно поставить перегородку — и одно большое помещение превратится в две небольших комнаты или один маленький кабинет и средних размеров гостиную.

Не менее актуальным будет разделение помещений, имеющих неправильную планировку, располагающихся буквой Г или имеющих глубокие придаточные ниши, образующиеся, например, при отгораживании прихожей от основного жилого пространства. В этом случае помещение просто выравнивается, перегородка монтируется по линии стены, граничащей с ответвлением комнаты. Так можно улучшить геометрию помещения и упростить дальнейшую реализацию стилистических идей и задумок, требующих симметричного расположения комнаты.

Как именно произвести зонирование? Прием зонирования часто применяется в современных интерьерах и проводится с использованием нескольких простых технических решений:

  • Установка глухой перегородки с аркой или проемом — используются гипсокартон, цементная плита или другой панельный материал для быстрого монтажа. Минус такого решения очевиден: глухая перегородка препятствует распространению естественного освещения, особенно если в комнате одно окно. Но при этом глухая стена обеспечивает необходимый уровень приватности и удобна в случае, если в комнате оборудуется спальное место.
  • Перегородка-стеллаж — стеллажная система с полками небольшой ширины позволит улучшить декор помещения, если разместить на ней различные аксессуары и прочие мелочи. Кроме того, она разделит комнату на две части, не мешая циркуляции воздуха и распространению солнечного света внутри помещения. Удобное решение, если требуется визуальное разделение пространства и создание симметричной комнаты.
  • Перегородка из прозрачных блоков — такое решение используется незаслуженно редко в интерьере. Прозрачные стеклянные блоки пропускают свет, рассеивая его, вместе с тем создают ощущение приватности, ведь с их помощью можно полностью отгородиться от внешнего пространства комнаты.
  • Подиум на полу или объемная конструкция на потолке — произвести зонирование можно не только при помощи воздвижения стен, но и изменяя высоту помещения. Так, можно установить подиум по размерам рабочего стола, четко отгородив тем самым рабочее пространство от остальной комнаты. То же можно сделать и при помощи объемной потолочной конструкции с направленным освещением.

Также использовать для зонирования можно контрастные цветовые переходы. Реализовать эту идею можно при помощи окрашивания стены в два контрастных оттенка или же используя обои контрастных цветов, но со схожей текстурой из одной коллекции. Это же решение применимо при использовании напольных отделочных материалов, ламината или плитки, которые часто бывают представлены несколькими контрастными вариантами в одной коллекции. В результате текстура материалов сохраняет общую стилистику пространства, а отличия цветовой палитры проводят четкую грань между двумя частями помещения.


Какой стиль подойдет лучше всего

Какой конкретно стиль использовать для того, чтобы создать привлекательный дизайн гостиной 17 кв м? Возможности оформления такого помещения безграничны. Рассмотрим наиболее предпочтительные интерьерные стили и их особенности, для того чтобы выбрать что-то подходящее под требования владельцев жилплощади и их темперамент.

Современный стиль

Современный стиль — это беспроигрышное решение, которое всегда смотрится эффектно. Для этого направления характерны мягкие цветовые сочетания, минимальный объем декора, функциональная мебель, не загромождающая пространство. Все должно быть направлено на создание комфорта для проживающих людей. Отсутствие лишних элементов соединяется с продуманным функционалом быта.

Для современного стиля обязательна компоновка различных источников света, использование модульной мебели и натуральных материалов в интерьере.


Классика

Классический стиль не потеряет своей актуальности никогда. Он оптимален для больших и средних помещений с правильными пропорциями длины и ширины. Характерной особенностью является обилие декоративных элементов, в том числе массивного декора в виде лепнины, ажурных рам для зеркал и картин. Массивная мебель с резьбой, а также потолочная люстра дополнят ощущение дворцового стиля. Конечно же, предпочтительно использование теплых тонов и позолоты на декоративных элементах оформления.


Минимализм

Минимализм подойдет для поклонников открытого пространства и аскетичного образа жизни, при котором комфорт сводится к владению только самыми нужными вещами. Особенность стиля заложена в его названии. Для него характерно полное отсутствие декора. Сдержанная цветовая палитра, строгие прямые линии в разграничении помещения, используемой мебели и убранстве. Часто используется корпусная мебель из современных плитных материалов.

Скандинавский стиль

Данное направление объединяет в себе множество разных стилистических особенностей, характерных для современного интерьерного дизайна скандинавских стран. Основной упор делается на функциональность интерьера, отсутствие вычурных элементов. Широко используются натуральные материалы: дерево, камень, металл. Приветствуется сдержанная серая палитра. Мебель имеет утилитарный характер. Простота такого интерьера, его холодная сдержанность являются главным преимуществом.

Лофт

Лофт предполагает наличие большого свободного пространства и оптимален для гостиной среднего или большого размера. Для этого стиля также характерен минимализм. Приветствуется наличие в интерьере элементов мебели и убранства из металла, в том числе промышленной прокатной стали, использование промышленных светильников. Полы могут быть бетонными или каменными, голые кирпичные стены задают тон всему интерьеру. Если в помещении имеются окна в пол, то реализация стиля лофт практически обязательна для вас.


От чего зависит выбор цветовой палитры интерьера

Цветовая палитра, используемая в интерьере, способна оживить его, сделать ярким и оригинальным. При выборе палитры, включающей в себя до 3 основных цветов и несколько их оттенков, нужно учитывать следующие особенности:

  • Целевое назначение помещения — гостиная обычно используется для отдыха, в ней уместны пастельные, теплые и сдержанные цвета.
  • Уровень освещенности — если в комнате много солнечного света, стоит выбрать более темные тона, приглушающие его. Если же комната выходит на север и света в помещении мало, нужно использовать более яркие желтые, оранжевые цветовые решения, воздержаться от холодных тонов.
  • Для каждого стиля характерна своя палитра. Для классического это теплые оттенки золотого, для скандинавского стиля — серые цвета, темные оттенки голубого, в кантри используются натуральные материалы и приветствуются все оттенки натурального дерева и т. д.

Таким образом, выбирать палитру цветов и оттенков нужно, взвешивая все особенности помещения и подбирая выигрышные и компромиссные решения.

Оценка интенсивности дозы TNT-подхода на исходы местно-распространенного рака прямой кишки.

Резюме

258

Справочная информация: Пациентов с клиническими стадиями местнораспространенного рака прямой кишки II или III можно лечить с помощью подхода тотальной неоадъювантной терапии (ТНТ); химиотерапия 4 мес. FOLFOX с последующей химиолучевой терапией (химиотерапия/рентгенотерапия) капецитабином в течение 5 недель перед операцией. Мы предположили, что полная интенсивность дозы не является необходимой для получения положительного эффекта от лечения. Методы: Был проведен ретроспективный обзор карт пациентов с недавно диагностированным раком прямой кишки, которым междисциплинарный (многопрофильный) совет по опухолям колоректального рака в Онкологическом центре Университета Колорадо (UCCC) рекомендовал лечение ТНТ. Основная цель состояла в том, чтобы оценить интенсивность дозы TNT и ее влияние на ответ, оцениваемый с помощью биопсии и/или визуализации (МРТ). Результаты: В период с 31 января 2016 г. по 31 января 2019 г. команда multiD рекомендовала подход TNT для лечения рака 80 пациентам.Из них 48 завершили неоадъювантное лечение в UCCC и были включены в анализ. Средний возраст составлял 55 лет (от 23 до 80 лет), 61% из них были мужчинами. У 31 пациента ECOG равнялся 0, а у 17 — ECOG 1. Общий ответ представлял собой 44 % полного ответа (CR, n = 21), 15 % почти полного ответа (nCR, n = 7), 35 % частичного ответа ( PR, n = 17) и 6% не ответили (NR, n = 3). См. Таблицу ответов, наблюдаемых в зависимости от интенсивности дозы химиотерапии. Двум пациентам не был проведен полный запланированный курс XRT, а у 9 пациентов дозы капецитабина были сохранены/снижены во время химиолучевой терапии. Выводы: Этот одноцентровый ретроспективный анализ пациентов, получавших ТНТ для лечения рака прямой кишки, предоставляет данные, подтверждающие, что достижение полной интенсивности дозы не обязательно для достижения положительного результата лечения.

© Американское общество клинической онкологии, 2020 г.

Спонсор исследования:

Нет

5

93,2%
Folfox Folrouracil Bolus (400 мг / м2) фторурацил Civi (2400 мг / м2) лейковорин
(400 мг / м2)
oxaliplatin
(85 мг / м2)
Всего населения (n = 43) 64.9% 95% 95% 89% 89% 87,9%
63,4% 63,4% 96,9% 96,9% 95% 86,6%
= 7) 61,8% 100% 82% 82% 82% 89,7%
72,4% 95,7% 95,7% 93,5% 89%
Нет ответа (n = 3) 45. 8% 97,9% 458% 458% 458% 86.1%
Capeox CapeCitabine (2000 мг / м2 / день) oxaliplatin
(130 мг / м2)
Общая численность населения (N = 5) 50,6% 60,6% 60,1% 90,1%
49,8% 49,8% 73,2%
Частичный ответ (N = 3 ) 51% 51. 4%

ВИДЕО: Air TNT: Россия предупреждает Запад массированной демонстрацией огневой мощи ПВО

Российские военные заявляют, что успешно испытали свою систему противоракетной обороны, предотвратив смоделированную крупномасштабную воздушную атаку противника.

Военные учения прошли на полигоне Капустин Яр в Астраханской области на юге России.Кадры учений были опубликованы Минобороны РФ 29 октября.

В учениях задействованы крупномасштабные подразделения ПВО и зенитно-ракетные комплексы большой, средней и малой дальности, говорится в распространенном днем ​​ранее заявлении министерства.

Масштабная имитация атаки была нейтрализована эшелонированной системой ПВО, состоящей из различных комплексов, в том числе С-300В4, «Бук-М3» и «Тор-М2», сообщили в Минобороны.

Имитированная атака была произведена высокоскоростными ракетами, крылатыми ракетами и ударными вертолетами.

На кадрах виден момент, когда российские комплексы вооружения реагируют на угрозу и выпускают несколько залпов зенитных ракет.

На днях в Астраханской области на юге России прошли масштабные учения ПВО с участием ракетных комплексов С-300В4, «Бук-М3» и «Тор-М2». (Министерство обороны Российской Федерации/Zenger)

Первый эшелон системы обороны составили дивизионы зенитно-ракетных комплексов большой дальности С-300В4, которые уничтожали аэробаллистические ракеты, спускавшиеся с высоты более 150 километров. (около 93 миль)

Система противоракетной обороны С-300В4 считается одной из самых эффективных систем такого типа в мире.Он стоит около 300 миллионов долларов за единицу и был продан нескольким военным, включая Китай и Турцию.

Второй эшелон обороны состоял из ЗРК средней дальности «Бук-М3» и дивизиона зенитно-ракетных комплексов малой дальности «Тор-М2».

Эти две системы предназначены для защиты от крылатых ракет противника, летящих на очень малых высотах.

В учении по противоракетной обороне приняли участие более 1000 военнослужащих и 300 единиц вооружения и военной техники.(Министерство обороны Российской Федерации/Zenger)

Ракетный комплекс «Бук» — это самоходный зенитно-ракетный комплекс средней дальности, разработанный Советским Союзом в 1980 году. Он способен сбивать крылатые ракеты, умные бомбы, самолеты и вертолеты, а также беспилотные летательные аппараты. Он имеет рабочий диапазон 30 километров (примерно 18,5 миль).

Ракетный комплекс «Тор» — зенитный ракетный комплекс малой дальности, предназначенный для поражения вертолетов, самолетов, высокоточных крылатых ракет и беспилотных летательных аппаратов.

Комплекс «Тор» «осуществил боевые пуски по групповым воздушным целям, имитирующим налет «роя» беспилотных летательных аппаратов условного противника на дальность до 15 километров», — сообщили в ведомстве.

В тылу системы обороны были размещены бронемашины «Тайфун» из подразделения ПВО «Тайфун», чтобы поражать цели на очень близком расстоянии менее шести километров на высоте менее 3500 метров (11 482 фута).

В учениях было задействовано более 1000 военнослужащих и 300 единиц вооружения и военной техники, все цели успешно поражены, сообщили в министерстве.

Под редакцией Мэтью Б. Холла и Кристен Батлер

Рекомендовано нашими партнерами

VITTORIA-MEZCAL TNT 27.5X2.1 ANT/BLK G+(111.3M2.32.52.611HD)

Эта политика конфиденциальности определяет, как мы используем и защищаем любую информацию, которую вы предоставляете нам при использовании этого веб-сайта.

Мы стремимся обеспечить защиту вашей конфиденциальности. Если мы попросим вас предоставить определенную информацию, по которой вас можно идентифицировать при использовании этого веб-сайта, вы можете быть уверены, что она будет использоваться только в соответствии с настоящим заявлением о конфиденциальности.

Мы можем время от времени изменять эту политику, обновляя эту страницу. Вам следует время от времени проверять эту страницу, чтобы убедиться, что вы довольны любыми изменениями.

Что мы собираем

Мы можем собирать следующую информацию:

  • имя и должность
  • контактная информация, включая адрес электронной почты
  • демографическая информация, такая как почтовый индекс, предпочтения и интересы
  • прочая информация, относящаяся к опросам клиентов и/или предложениям

Что мы делаем с собранной информацией

Нам нужна эта информация, чтобы понять ваши потребности и предоставить вам лучший сервис, и, в частности, по следующим причинам:

  • Внутренний учет.
  • Мы можем использовать эту информацию для улучшения наших продуктов и услуг.
  • Мы можем периодически отправлять рекламные электронные письма о новых продуктах, специальных предложениях или другой информации, которая, по нашему мнению, может показаться вам интересной, используя предоставленный вами адрес электронной почты.
  • Время от времени мы также можем использовать вашу информацию, чтобы связаться с вами в целях исследования рынка. Мы можем связаться с вами по электронной почте, телефону или почте. Мы можем использовать эту информацию для настройки веб-сайта в соответствии с вашими интересами.

Безопасность

Мы стремимся обеспечить безопасность вашей информации. Чтобы предотвратить несанкционированный доступ или раскрытие информации, мы внедрили подходящие физические, электронные и управленческие процедуры для защиты и защиты информации, которую мы собираем в Интернете.

Как мы используем файлы cookie

Файл cookie — это небольшой файл, который запрашивает разрешение на размещение на жестком диске вашего компьютера. Как только вы соглашаетесь, файл добавляется, и файл cookie помогает анализировать веб-трафик или сообщает вам, когда вы посещаете определенный сайт.Файлы cookie позволяют веб-приложениям реагировать на вас как на личность. Веб-приложение может адаптировать свои операции к вашим потребностям, симпатиям и антипатиям, собирая и запоминая информацию о ваших предпочтениях.

Мы используем файлы cookie журнала трафика, чтобы определить, какие страницы используются. Это помогает нам анализировать данные о трафике веб-страницы и улучшать наш веб-сайт, чтобы адаптировать его к потребностям клиентов. Мы используем эту информацию только для целей статистического анализа, после чего данные удаляются из системы.
В целом файлы cookie помогают нам сделать веб-сайт лучше, позволяя нам отслеживать, какие страницы вы считаете полезными, а какие нет. Файл cookie никоим образом не дает нам доступа к вашему компьютеру или какой-либо информации о вас, кроме данных, которыми вы решили поделиться с нами.
Вы можете принять или отклонить файлы cookie. Большинство веб-браузеров автоматически принимают файлы cookie, но обычно вы можете изменить настройки своего браузера, чтобы отказаться от файлов cookie, если хотите. Это может помешать вам воспользоваться всеми преимуществами веб-сайта.

Ссылки на другие сайты

Наш веб-сайт может содержать ссылки на другие интересующие вас веб-сайты. Однако, как только вы использовали эти ссылки, чтобы покинуть наш сайт, вы должны помнить, что мы не имеем никакого контроля над этим другим сайтом. Поэтому мы не можем нести ответственность за защиту и конфиденциальность любой информации, которую вы предоставляете во время посещения таких сайтов, и такие сайты не регулируются настоящим заявлением о конфиденциальности. Вам следует проявлять осторожность и ознакомиться с заявлением о конфиденциальности, применимым к рассматриваемому веб-сайту.

Управление вашей личной информацией

Вы можете ограничить сбор или использование вашей личной информации следующими способами:

  • всякий раз, когда вас просят заполнить форму на веб-сайте, найдите поле, которое вы можете щелкнуть, чтобы указать, что вы не хотите, чтобы информация использовалась кем-либо в целях прямого маркетинга
  • , если вы ранее давали нам согласие на использование вашей личной информации в целях прямого маркетинга, вы можете изменить свое решение в любое время, написав нам или отправив электронное письмо.

Мы не будем продавать, распространять или сдавать в аренду вашу личную информацию третьим лицам, если у нас нет вашего разрешения или это требуется по закону. Мы можем использовать вашу личную информацию для отправки вам рекламной информации о третьих лицах, которая, по нашему мнению, может вас заинтересовать, если вы сообщите нам, что хотите, чтобы это произошло.

Если вы считаете, что какая-либо информация, которую мы храним о вас, неверна или неполна, пожалуйста, напишите нам или напишите нам как можно скорее по указанному выше адресу.Мы оперативно исправим любую информацию, которая окажется неверной.

Низкое мышечное ослабление является прогностическим фактором выживания у пациентов с метастатическим раком молочной железы, получающих паллиативную химиотерапию первой линии

Задний план: Низкая мышечная масса (LMM) и низкое мышечное ослабление (LMA) отражают соответственно низкое количество мышц и низкое качество мышц. Оба связаны с плохим исходом при нескольких типах солидных злокачественных новообразований.Это исследование определило связь показателей скелетных мышц с общей выживаемостью (ОВ) и временем до следующего лечения (TNT).

Пациенты и методы: Скелетно-мышечный индекс (SMI) в см 2 /m 2 и ослабление мышц (MA) в единицах Хаунсфилда (HU) измеряли с помощью абдоминальной КТ у 166 пациенток перед началом химиотерапии первой линии по поводу метастатического рака молочной железы. .Низкая мышечная масса (SMI <41 см 2 /m 2 ), саркопеническое ожирение (LMM и BMI ≥30 кг/м 2 ) и низкое ослабление мышц (MA <41 HU и BMI <25 кг/м2 или Масса тела <33 HU и ИМТ ≥25 кг/м2) были связаны с OS и TNT.

Результаты: Распространенность LMM, саркопенического ожирения и LMA составила 66,9%, 7,2% и 59,6% соответственно. LMM и саркопеническое ожирение не показали значительной связи с OS и TNT, тогда как LMA был связан как с более низкой OS (HR 2.04, 95% ДИ 1,34–3,12, р = 0,001) и более короткий ТНТ (ОР 1,72, 95% ДИ 1,14–2,62, р = 0,010). У пациентов с LMA медиана OS и TNT составляла 15 и 8 месяцев соответственно, по сравнению с 23 и 10 месяцами у пациентов с нормальным MA.

Вывод: LMA является прогностическим фактором для OS и TNT у пациентов с метастатическим раком молочной железы, получающих паллиативную химиотерапию первой линии, тогда как LMM и саркопеническое ожирение не являются.Необходимы дальнейшие исследования, чтобы установить, какое влияние LMA должна оказывать на повседневную клиническую практику.

Ключевые слова: Рак молочной железы; ослабление мышц; Мышечная масса; Общая выживаемость; Саркопения.

Нанотрубки диоксида титана способствуют поляризации M2 путем ингибирования гликолиза макрофагов и, в конечном счете, ускоряют эндотелизацию — Yu — 2021 — Иммунитет, воспаление и заболевания

1 ВВЕДЕНИЕ

Болезни сердечных клапанов представляют собой серьезную проблему общественного здравоохранения, и заболеваемость ими растет день ото дня. 1 Потенциальное лечение включает замену клапанов биологическими, аллогенными или механическими протезами. Они широко используются для замены поврежденных сердечных клапанов и считаются лучшим средством для лечения пациентов с тяжелым клапанным стенозом или регургитацией. 2 Однако используемые в клинической практике заменители механического клапана и биологического клапана имеют серьезные дефекты, при которых замена механического клапана требует пожизненной антикоагулянтной терапии и легко вызывает кровотечение и эмболию.

Биоматериалы на основе титана широко используются в сосудистых стентах, тромбофильтрах и других внутрисосудистых медицинских устройствах. Однако отторжение имплантата часто происходит из-за поверхностного тромбоза и эндотелиальной дисфункции. 3 В последние годы наноматериалы с уникальной структурой массива нанотрубок привлекли большое внимание в области костной имплантации, доставки лекарств, лечения опухолей и биоматериалов, контактирующих с кровью. 4 Массивы нанотрубок на поверхности титана не только обладают хорошими механическими свойствами и коррозионной стойкостью самого титана, но и создают уникальную структуру нанотрубок на поверхности титана для улучшения биосовместимости.Однако было опубликовано несколько исследований влияния диаметра нанотрубок и наноматриц на поведение эндотелиальных клеток. Исследования показали, что титановые нанотрубки (ТНТ) разного диаметра могут способствовать поляризации М2 макрофагов, высвобождать больше фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и ускорять эндотелизацию путем активации сигнальных путей ERK1/2 и PI3K/AKT. 5 Кроме того, связь между TNT и метаболизмом иммунных клеток неясна.

Макрофаги играют незаменимую роль в иммунитете человека, и они могут производить различные эффекторные клетки в зависимости от окружающей среды. 6, 7 Наиболее представительными являются фенотипы М1 и М2. С точки зрения защиты хозяина, макрофаги М1 обладают воспалительными свойствами и положительно влияют на микробные патогены и опухолевый иммунитет, тогда как макрофаги М2 способствуют восстановлению тканей и метаболическому гомеостазу, играя ключевую роль в паразитарном иммунитете. 8 Однако иммунная система постоянно ощущает и реагирует на экологические угрозы, требующие значительных биоэнергетических затрат. Одновременно метаболические процессы составляют основу синтеза РНК, ДНК, белков и мембран, необходимых для пролиферации и активации иммунных клеток. 9 Другими словами, влияние клеточного метаболизма на ряд физиологических активностей иммунных клеток все еще невообразимо. Эта огромная «энергетическая стоимость» в основном решается за счет гликолиза, цикла трикарбоновых кислот и окислительного фосфорилирования. В начале 1990-х Bustos и Sobrino 10 первыми предположили ингибирующее действие глюкокортикоидов на продукцию цитокинов макрофагами, что может быть связано с ингибированием гликолитических ферментов PKF1 и PKF2. Макрофаги M1 в значительной степени зависят от аэробного гликолиза, тогда как макрофаги M2 в основном используют окисление жирных кислот (FAO; β-окисление), чтобы способствовать митохондриальному окислительному фосфорилированию. 11 Эти исследования полностью продемонстрировали, что фенотип макрофагов можно трансформировать, регулируя клеточный метаболизм. Среди них гликолиз в макрофагах М1 имеет четкое заключение, но связь между гликолизом и макрофагами М2 не ясна.

Однако связь между ТНТ и гликолизом не ясна. В этом исследовании были приготовлены ТНТ разных размеров (ТНТ20 и ТНТ60) при разном напряжении (20 и 60 В) для выяснения механизмов внутренней иммунной регуляции, поляризации макрофагов и ускоренной эндотелизации ТНТ, а также того, зависит ли диаметр нанотрубки затронуты.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Материалы

Среда Игла, модифицированная Дульбекко (DMEM), среда Мемориального института Розуэлл-Парк (RPMI 1640), эмбриональная телячья сыворотка (FBS), раствор красителя 4′,6-диамидино-2-фенилиндола (DAPI) и 0,25% раствор трипсина-ЭДТА. куплена у Sangon Biotech. Пенициллин-стрептомицин и форбол 12-миристат-13-ацетат (ФМА) были приобретены у компании Solarbio Science & Technology Co., Ltd.Фторид аммония и этиленгликоль (химреактив Sinopharm). Набор для подсчета клеток-8 (CCK-8) и раствор Matrigel (BD Biosciences). Набор для анализа молочной кислоты (колориметрический метод) и набор для анализа глюкозы (метод с O-толуидином) были приобретены у Lengton Biotechnology. Анти-Glut1, анти-HK2, анти-CD86, анти-CD206, ослиные антикроличьи вторичные антитела, анти-AMPK-α и ингибиторы AMPK были приобретены у Abcam. В Baoti был приобретен титановый стержень медицинского назначения.

3 МЕТОДЫ

3.

1 Приготовление и характеристика тротила

Круглая деталь диаметром 34 мм и толщиной 1 мм была изготовлена ​​компанией Ti. Для получения тротила использовали метод анодного окисления. 12 Вкратце, Ti подвергали ультразвуковой обработке этанолом, ацетоном и бидистиллированной водой с последующей полировкой в ​​течение 1  мин полирующей водой, содержащей HF, HNO 3 и H 2 O (объемное соотношение: 1:4). :5). При разных напряжениях (20 и 60 В) Ti помещали в раствор электролита, состоящий из фторида аммония (2.6 г), бидистиллированная вода (50 мл) и этиленгликоль (450 мл в течение 60 мин. В качестве контроля использовали не подвергнутый электролизу титановый субстрат (обозначен как Ti). Перед посевом клеток планшет подвергали воздействию ультрафиолетового излучения в течение 1 ч. Морфологию и топографию поверхности образцов Ti охарактеризовали с помощью сканирующего электронного микроскопа (СЭМ; JSM-6700F; JEOL).

3.

2 Культура клеток Культивировали

THP1 (клетки острого моноцитарного лейкоза человека) и HUVEC (эндотелиальные клетки пупочной вены человека).Клетки THP1 были приобретены в банке клеток Китайской академии наук, а клетки HUVEC были приобретены в ATCC. Клетки THP1 культивировали в среде RPMI, содержащей 10% FBS, в стандартных условиях (5% CO 2 , 37°C и 100% влажность). Перед использованием клетки THP1 обрабатывали ФМА (100 нг/мл). Затем клетки инокулировали на Ti, TNT20 и TNT60. Через 3 дня культивирования среду собирали и смешивали с DMEM с высоким гликемическим индексом в соотношении 1:1 для приготовления кондиционированной среды (CM).HUVEC культивировали в среде DMEM, содержащей 10% FBS, в стандартных условиях. После того как клетки достигли степени слияния 85%, для субкультивирования использовали 0,25% трипсин-ЭДТА.

3.3 Влияние ТНТ на гликолиз макрофагов

3.3.1 Анализы глюкозы и лактата

Клетки помещали в 12-луночные планшеты с разными стимулирующими материалами в разных планшетах (пустой контроль, Ti, TNT20 и TNT60), после инкубации в течение 24 ч получали супернатант. Оба анализа были выполнены в соответствии с инструкциями к наборам. Поглощение цвета имеет линейную зависимость от содержания молочной кислоты при 530 нм. Принцип набора для обнаружения глюкозы заключается в том, что глюкоза конденсируется с O-толуидином в горячем растворе уксусной кислоты с образованием основания Шиффа синего цвета с пиком поглощения при 630 нм. Для измерений использовали среду DMEM с высоким содержанием глюкозы. Потребление глюкозы рассчитывали путем вычитания количества глюкозы в образце из количества глюкозы в среде без клеток.Производство лактата рассчитывали путем вычитания концентрации любого лактата в среде без клеток из концентрации образцов. Параллельно проводили анализы на глюкозу и лактат.

3.3.2 Количественный анализ полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Суммарная РНК была выделена с помощью реагента Trizol (Thermo Fisher Scientific) и подвергнута обратной транскрипции с помощью системы EASTWIN в соответствии с инструкциями производителя. Уровни экспрессии GLUT1 и HK2 определяли с помощью количественной ПЦР в реальном времени (RT-qPCR) с использованием системы ПЦР в реальном времени StepOne (Applied Biosystems), а β-актин использовали в качестве внутреннего эталонного гена.Праймеры, использованные для амплификации в этом исследовании, приведены в таблице 1 (Generay Biotech).

Таблица 1. Праймер, используемый в этом исследовании
Направление гена и праймера Последовательность (5′–3′)
Бета-актин человека Вперед GACGGCCAGGTCATCACTATTG
Реверс АГГААГГКТГГААААГАГКК
ARG человека Вперед GTGGAAACTTGCATGGACAAC
Реверс AATCTGGCACATCGGGAATC
CD206 человека Вперед TCCGGGTGCTGTTCTCCTA
Реверс CCAGTCTGTTTTTGATGGCACT
iNOS человека Вперед ТТКАГТАТКАКААККТКАГКААГ
Реверс TGGACCTGCAAGTTAAAATCCC
IL-1β человека Вперед АТГАТГГСТТАТТАКАГТГГЦАА
Реверс GTCGGAGATTCGTAGCTGGA
VEGF человека Вперед ATCGAGTACATCTTCAAGCCAT
Реверс GTGAGGTTTGATCCGCATAATC
Человеческий жир1 Вперед CACGCTATGGGGAGAG
Реверс ККАКАГАГААГГАГККАА
Человек HK2 Вперед CTGAGGACATCATGCGAGGCA
Реверс ГТГГКАГГГГААКГАГААГГТ
  • Сокращения: ARG, аргиназа; CD206, рецептор маннозы; Glut1, переносчик глюкозы типа 1; HK2, гексокиназа 2; ИЛ, интерлейкин; iNOS, индуцируемая синтаза оксида азота; VEGF, фактор роста эндотелия сосудов.
3.3.3 Вестерн-блоттинг
Белки

экстрагировали с помощью реагента для экстракции белков млекопитающих M-PER (Thermo Fisher Scientific), и их концентрацию измеряли с помощью набора для анализа белков BCA (Thermo Fisher Scientific). Вестерн-блоттинг использовали для определения экспрессии белков GLUT1 и HK2. Пятнадцать микролитров каждого клеточного экстракта разделяли электрофорезом и переносили на поливинилиденфторидную мембрану.Во-вторых, мембрану блокировали 5% бычьим сывороточным альбумином на 1 ч и инкубировали с первичными антителами в течение ночи. Затем мембрану трижды промывали и инкубировали с ослиными вторичными антителами против кроликов (1:100) при комнатной температуре в течение 1 часа. Наконец, мембрана была экспонирована с помощью имидж-сканера TANON.

3.3.4 Поляризация макрофагов

Поляризацию макрофагов наблюдали с помощью непрямого иммунофлуоресцентного окрашивания перед прохождением через конфокальный лазерный сканирующий микроскоп (CLSM). В качестве провоспалительного маркера использовали кроличье античеловеческое антитело к CD86 (1:100), а в качестве противовоспалительного маркера использовали кроличье античеловеческое антитело к CD206 (1:50). Клетки иммобилизовали в параформальдегиде при 4°С в течение 10 мин, а затем обрабатывали 0,1% тритоном Х-100 (Sigma-Aldrich) в течение 10 мин. После блокировки 5% бычьим сывороточным альбумином клетки инкубировали с первичными антителами в течение ночи при 4°С. Затем для визуализации клеток использовали вторичные антитела против кроличьего иммуноглобулина G (1:100). Ядра окрашивали DAPI (1 мг/мл). Короче говоря, после вышеуказанных шагов жидкость отсасывали, дважды промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и добавляли окрашивающий раствор DAPI.Жидкость окрашивали при комнатной температуре в течение 15 мин в темноте. все образцы наблюдались с помощью CLSM.

3.3.5 Экспрессия гена воспаления

С помощью RT-qPCR были обнаружены два гена, родственные M1, интерлейкин-1 (IL-1) и iNOS, и два гена, родственные M2, ARG1 и CD206. Кроме того, были обнаружены уровни матричной РНК (мРНК) VEGF. Относительную экспрессию гена нормализовали с помощью гена домашнего хозяйства β-актина. Используемые праймеры для ПЦР перечислены в таблице 1.

3.3.6 Обнаружение воспалительных цитокинов

Затем с помощью хемилюминесценции исследовали провоспалительные цитокины (IL-1β и IL-8) и противовоспалительные цитокины (ARG и IL-10). Собирали супернатанты макрофагов, а затем определяли супернатант с помощью соответствующего набора для детекции (Sangon Biotech) в соответствии с инструкциями производителя (которые включали набор IL-1, набор IL-8, набор ARG, набор IL-10, и набор VEGF).Наконец, для анализа использовали IMMULITE 1000.

3.4 Влияние среды, кондиционированной макрофагами, на эндотелизацию HUVEC

3.4.1 Оценка адгезии HUVEC

Для использования была собрана кондиционированная среда для макрофагов, обработанных тремя материалами (Ti, TNT20 и TNT60). HUVEC культивировали в 96-луночных планшетах при плотности 2 × 10 5 клеток/мл в CM. Через 2, 6 или 12 ч лунки трижды промывали PBS.Раствор CCK-8 использовали для культивирования прилипших клеток в течение 2 ч и считывали на фильтре 450 нм.

3.4.2 Оценка распространения HUVEC

Для оценки пролиферации HUVEC в различных кондиционированных средах 2 × 10 4 клеток высевали в 96-луночные планшеты. Через 1, 3 или 5 дней в каждую лунку добавляли по 10 мкл раствора CCK-8. Клетки инкубировали в течение 2 ч, а затем измеряли оптическую плотность при 450 нм с помощью устройства для считывания микропланшетов.

3.4.3 Анализ соскоба

Анализ царапин 13 использовали для оценки способности эндотелиальных клеток к миграции. HUVEC высевали в шестилуночный планшет. Когда клетки достигли 100% слияния, монослой клеток соскребали пипеткой, а затем трижды промывали PBS. Добавляли кондиционированную среду и наблюдали за результатами через 0 и 6 часов. Программное обеспечение ImageJ использовалось для оценки площади царапины.

3.4.4 Анализ образования трубок

После совместного культивирования HUVEC с Matrigel (Matrigel представляет собой растворимый экстракт базальной мембраны, экстрагированный из мышиной саркомы Engelbreth-Holm-Swarm, который может быть полимеризован в биоактивный матричный материал), были сформированы капилляроподобные структуры. 5 96-луночные планшеты покрывали 50 мкл матригеля и инкубировали при 37°C в течение 30 мин. HUVEC высевали с плотностью 4 × 10 5 /мл со 100 мкл кондиционированной среды и визуализировали после инкубации в течение 6 часов.Программное обеспечение ImageJ использовалось для оценки точек ветвления и общей длины трубки каждого поля.

3.5 Механизм TNT-ингибирующего гликолиза

Для изучения механизма воздействия ТНТ на гликолиз макрофагов было обнаружено фосфорилирование классического сигнального пути, активируемого аденозинмонофосфат-активируемой протеинкиназой (AMPK), связанного с метаболизмом. Чтобы проверить, передается ли сигнальный путь AMPK, для сравнения добавляли ингибиторы AMPK.Экспрессию родственных белков детектировали вестерн-блоттингом. Кондиционированные среды собирали для каждой группы, чтобы оценить влияние HUVEC на ряд физиологических активностей (пролиферация, адгезия, миграция и образование). При этом определяли количество VEGF, высвобождаемого макрофагами из супернатанта, собранного в каждой группе. Экспрессию мРНК VEGF количественно анализировали с помощью ОТ-ПЦР.

3.5.1 Статистический анализ

Данные были проанализированы с помощью GraphPad Prism8 и представлены как среднее  ±  SD .Однофакторный дисперсионный анализ был использован для определения значимых различий. Значение вероятности менее 0,05 ( p  < 0,05) считалось статистически значимым.

4 РЕЗУЛЬТАТ

4.1 Характеристика поверхностей TNT

Титан

обрабатывали анодным оксидированием при различных напряжениях (20 и 60 В), а затем наблюдали морфологию поверхности с помощью СЭМ. Как показано на рисунке 1A, на поверхностях TNT20 и TNT60 наблюдались регулярные наномассивы по сравнению с пластинами из чистого титана (Ti), а диаметр нанотрубок увеличивался с увеличением напряжения.После анализа программного обеспечения ImageJ диаметр нанотрубок составил 51,453 ± 9,629 нм (TNT20) и 100,969 ± 16,877 нм (TNT60) (рис. 1B).

Характеристика нанотрубок диоксида титана. (A) Морфология поверхности трех образцов. (Ti, TNT20 и TNT60), наблюдаемые с помощью сканирующей электронной микроскопии при различном увеличении. (B) Диаметры нанотрубок. Результаты представлены как среднее  ±  SD ( N  = 3). Ti, чистый титан; тротил, титановые нанотрубки; * р  < .05 и ** p  < .01

4.2 Влияние ТНТ на гликолиз макрофагов

Взаимосвязь между ТНТ и поляризацией макрофагов была описана во многих исследованиях, как на модифицированных ТНТ. Предыдущие исследования показали, что наноматрицы на поверхности титановых пластин могут регулировать поляризацию макрофагов в сторону М2-типа, активируя аутофагию. 14 Ван и др. 15 также обнаружили, что ТНТ различного диаметра могут регулировать поляризацию макрофагов.Результаты показали, что ТНТ регулируют поляризацию макрофагов, влияя на клеточный метаболизм. Поэтому утилизацию глюкозы и выработку лактата измеряли, как показано на рисунке 2A, B. По сравнению с CON и Ti утилизация глюкозы TNT20 и TNT60 была снижена, что составляло 3,306 ± 0,174 и 3,184 ± 0,078 г/л соответственно (рис. 2А), и аналогичным образом производство молочной кислоты составляло 0,810 ± 0,033 (TNT20). ) и 0,780 ± 0,008 (ТНТ60) (рис. 2Б), и эти показатели отражают уровень гликолиза.Чтобы дополнительно проверить, ингибирует ли TNT гликолиз макрофагов, были выбраны два гена, которые представляют уровни гликолиза и измерения уровней экспрессии мРНК и белка, соответственно. Результаты показали, что экспрессия как мРНК, так и белка ингибировалась (рис. 2C,D), и считалось, что TNT каким-то образом ингибирует гликолиз макрофагов.

Влияние ТНТ на гликолиз макрофагов. Культуральные среды каждой группы (контроль, Ti, TNT20 и TNT60), стимулированные макрофагами, собирали для измерения уровня глюкозы (A) и лактата (B).(C) Экспрессия генов Glut1 и HK2 в макрофагах, стимулированных каждой группой (контроль, Ti, TNT20 и TNT60) в течение 48 часов, измерялась количественной полимеразной цепной реакцией в реальном времени. (D) Экспрессия белков Glut1 и HK2 в макрофагах, стимулированных каждой группой (контроль, Ti, TNT20 и TNT60) в течение 48 ч, была измерена с помощью вестерн-блоттинга. (E) Анализ экспрессии белков HK2 и Glut1 с использованием изображений, показанных на (D). Результаты представлены как среднее  ±  SD ( N  = 3).Ti, чистый титан; ТНТ, титановые нанотрубки. * p  < .05 и ** p  < .01

4.3 Анализ поляризации макрофагов

После обнаружения многих индикаторов из вышеперечисленных было известно, что TNT ингибирует гликолиз макрофагов. Чтобы определить, влияет ли ингибирование ТНТ на гликолиз на поляризацию макрофагов, была обнаружена экспрессия М1- и М2-родственных генов, проведен количественный анализ различных медиаторов воспаления в супернатанте каждой группы материалов, а также М1- и М2-макрофаги. обнаруживаются с помощью иммунофлюоресценции.Результаты ОТ-ПЦР показали, что экспрессия связанных с M1 генов IL-1β и iNOS снижалась в основном на поздней стадии (5–7 дней) (рис. 3E,F). Как показано на рисунке 3C,D, гены ARG и CD206, связанные с M2, активировались во все моменты времени, но самая высокая активация происходила на 5–7-й день. Результаты ОТ-ПЦР показали, что макрофаги имели тенденцию к М2-поляризации. Чтобы дополнительно проверить этот вывод, супернатант из каждой группы собирали для выявления факторов воспаления (IL-1β, IL-8, ARG1 и IL-10).IL-1β и iNOS, которые в основном секретируются макрофагами M1, были значительно снижены в группах TNT20 и TNT60. Напротив, уровень ARG1 и IL-10, секретируемых макрофагами M2, был повышен (рис. 3G). Под микроскопом группа Ti продемонстрировала более сильную флуоресценцию, когда с образцом инкубировали антитело против CD86, связанное с M1 (рис. 3B). Однако, когда образцы инкубировали с антителом CD206, TNT20 и TNT60 демонстрировали более сильную флуоресценцию, а TNT60 был более значительным, чем TNT20 (рис. 3A).Более того, результаты твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) и ОТ-ПЦР показали, что супернатант TNT20 и TNT60 содержал больше VEGF, а уровень экспрессии гена VEGF был выше, чем у других групп (рис. 3H,I). Эти данные свидетельствуют о том, что TNT изменяет поляризацию (по направлению к M2) макрофагов, влияя на уровень гликолиза макрофагов.

Поведение макрофагов на нанотрубках диоксида титана. (A) Конфокальное обнаружение маркерного белка M2 CD206 через 48 часов культивирования.(B) Конфокальное обнаружение маркерного белка M1 CD86 через 48 часов культивирования. (C – F) Обнаружение полимеразной цепной реакцией в реальном времени поляризации макрофагов и экспрессии генов, связанных с воспалением, через 24 часа культивирования. (G) Обнаружение воспалительных факторов в супернатантах. (H) ELISA секретируемого макрофагами VEGF в супернатантах через 72 часа культивирования. (I) Уровни экспрессии гена VEGF в макрофагах через 24 часа культивирования. Результаты представлены как среднее  ±  SD ( N  = 3). ARG, аргиназа; КОН, контроль; DAPI, 4′,6-диамидино-2-фенилиндол; ИФА, иммуноферментный анализ; ИЛ, интерлейкин; iNOS, индуцируемая синтаза оксида азота; мРНК, информационная РНК; Ti, чистый титан; тротил, титановые нанотрубки; VEGF, фактор роста эндотелия сосудов.* p  < .05 и ** p  < .01

4.4 Оценка поведения HUVEC, стимулированных кондиционированной средой (CM)

Миграция клеток, образование трубочек, пролиферация и адгезия были измерены для определения скорости эндотелизации, индуцированной поверхностным наночипом TNT через макрофаги. Как показано на рисунке 4A, CM из TNT20 и TNT60 усиливали миграцию HUVEC по сравнению с двумя другими группами. Коэффициент миграции каждой группы составил 29.8% ± 1,7% (CON), 39,8% ± 2,5% (Ti), 53,9% ± 1,8% (TNT20) и 64,8% ± 1,5% (TNT60) (рис. 4C). В то же время капилляроподобная структура была обнаружена в группах TNT20 и TNT60 и в большей степени обнаружена в группе TNT60 (рис. 4B). Кроме того, были количественно проанализированы общая длина и количество новых трубок в каждой группе, которые были CON < Ti < TNT20 < TNT60 (рис. 4D, E). Пролиферацию и адгезию эндотелиальных клеток оценивали с помощью раствора CCK-8. Как показано на рисунке 4F, G, эндотелиальные клетки продемонстрировали сильную способность к пролиферации на 3-й день, особенно в группах TNT20 и TNT60.Точно так же эндотелиальные клетки в каждой группе демонстрировали более сильную адгезию через 12 часов, а группа TNT60 была более значительной, чем другие группы. Эти результаты показывают, что кондиционированные среды из TNT20 и TNT60 ускоряют эндотелизацию in vitro, особенно в группе TNT60.

Оценка поведения HUVEC in vitro, стимулированных кондиционированной средой. (A) Репрезентативные изображения миграции HUVEC. (B) Репрезентативные изображения формирования трубки в течение 6 часов.(C) Процент покрытия после 6 часов заживления раны. (D) Количественный анализ количества новых трубок. (E) Количественный анализ длин новых трубок. (F) Пролиферация клеток в HUVEC в течение 1, 3 и 5 дней. (G) Адгезия клеток в HUVEC через 2, 6 и 12 часов. Результаты представлены как среднее  ±  SD ( N  = 3). КОН, контроль; HUVEC, эндотелиальные клетки пупочной вены человека; Ti, чистый титан; ТНТ, титановые нанотрубки. * p  < .05 и ** p  < .01

4.5 Влияние ингибиторов пути AMPK на эндотелизацию

После культивирования каждой группы материалов (Ti, TNT20 и TNT60) с макрофагами добавляли ингибиторы AMPK. Для каждой группы собирали CM для оценки влияния ингибиторов AMPK на эндотелизацию. Как видно из рисунка 5A–C, CM с ингибитором ингибировал миграцию и образование трубок эндотелиальных клеток. Кроме того, было показано, что пролиферация эндотелиальных клеток сильно затруднена (рис. 5D).Так, фосфорилирование AMPK оценивали вестерн-блоттингом. Как показано на рисунке 5E, как TNT20, так и TNT60 активировали фосфорилирование AMPK, и при добавлении ингибиторов AMPK уровни их фосфорилирования значительно снижаются. По результатам ИФА и ОТ-ПЦР содержание VEGF в супернатанте и уровень экспрессии генов TNT20 и TNT60 были ниже, чем у двух других групп (рис. 5F,G). Схематическая диаграмма этого исследования была изображена на рисунке 6. Эти данные свидетельствуют о том, что TNT (TNT60 более значим, чем TNT20) ингибирует гликолиз макрофагов, активирует сигнальный путь AMPK, а затем способствует поляризации M2 макрофагов, в конечном итоге ускоряя эндотелизацию.

Влияние ингибиторов пути AMPK на эндотелизацию. (A) Репрезентативные изображения миграции HUVEC. (B) Репрезентативные изображения формирования трубки в течение 6 часов. (C) Процент покрытия после 6 часов заживления раны. (D) Пролиферация клеток в HUVEC в течение 1, 3 и 5 дней. (E) Определение фосфорилирования AMPK в макрофагах с помощью вестерн-блоттинга. (F) Уровни экспрессии гена VEGF в макрофагах через 24 ч культивирования. (G) ELISA секретируемого макрофагами VEGF в супернатантах через 72 часа культивирования. Результаты представлены как среднее  ±  SD ( N  = 3). AMPK, протеинкиназа, активируемая аденозинмонофосфатом; COM-C: соединение C, ингибитор сигнального пути AMPK; КОН, контроль; ИФА, иммуноферментный анализ; HUVEC, эндотелиальные клетки пупочной вены человека; мРНК, информационная РНК; Ti, чистый титан; тротил, титановые нанотрубки; VEGF, фактор роста эндотелия сосудов. * p  < .05 и ** p  < .01

Схема этого исследования.AMPK, протеинкиназа, активируемая аденозинмонофосфатом; ARG, аргиназа; ИЛ, интерлейкин; iNOS, индуцируемая синтаза оксида азота; тротил, титановые нанотрубки; VEGF, фактор роста эндотелия сосудов; VEGF, рецептор фактора роста эндотелия сосудов

5 ОБСУЖДЕНИЕ

Во многих исследованиях обсуждалась важность титановых имплантатов в противовоспалительной реакции и подчеркивалась их роль в поверхностных наноматрицах. 1, 15-17 Важность гидрофильности для имплантатов не вызывает сомнений. TNT60 показал хорошую гидрофильность. 5 Кислотная обработка повышает гидрофильность тротила, 18 и чем больше диаметр тротила, тем лучше гидрофильность. 19 В основном это происходит из-за электростатического взаимодействия между положительно заряженными поверхностями материала и отрицательно заряженными клетками, которое способствует адгезии клеток. 20 Важно отметить, что TNT может улучшить секрецию оксида азота и VEGF в подходящем размере, тогда как последний является ключевым этапом, связанным с функцией эндотелиальных клеток. 21 Недавние исследования показали, что быстрая эндотелизация может уменьшить адгезию тромбоцитов. 22

Метаболизм способствует развитию, пролиферации, дифференцировке и эффектам или функциям, выполняемым клетками и тканями взрослых организмов. Гликолитический метаболический путь начинается с поглощения внеклеточной глюкозы из клеточного окружения с последующим внутриклеточным процессингом глюкозы в цитоплазме с образованием пирувата и многих других продуктов. Утилизация глюкозы в основном зависит от серии множественных ключевых ферментативных реакций, которые в конечном итоге приводят к производству молочной кислоты и двух чистых молекул аденозинтрифосфата (АТФ) в качестве источника энергии. Несколько исследований показали, что гликолиз имеет решающее значение для функции иммунных клеток. 23, 24 Это может стать неожиданностью, поскольку гликолиз не является наиболее распространенным способом производства АТФ. Также видно, что гликолиз может вызывать быструю активацию ферментов, участвующих в этом пути.Напротив, окислительное фосфорилирование, которое производит больше АТФ, является более медленным и более сложным процессом, который приводит к физиологической активности, требующей быстрого переключения производства АТФ на гликолиз. 25 Кроме того, GLUT1 действует как транспортер глюкозы, ограничивающий скорость, в провоспалительных поляризованных макрофагах. Исследования показали, что сверхэкспрессия GLUT1 в мышиной линии макрофагов Raw264. 7 приводит к значительному увеличению поглощения и метаболизма глюкозы. 26 В этом исследовании ТНТ культивировали совместно с макрофагами для обнаружения вышеуказанных экспериментальных индикаторов.Показано, что ТНТ оказывает ингибирующее действие на гликолиз макрофагов.

Потенциальной связью между гликолизом и активацией макрофагов М2 является продукция пирувата в результате гликолиза, который затем поступает в цикл трикарбоновых кислот для облегчения синтеза Ac-CoA и ацетилирования гистонов 27 или митохондриального OXPHOS. 28 Исследования показали наличие макрофагов и многоядерных клеток на границе каркаса титановых имплантатов на ранней стадии имплантации. 29, 30 Неправильная активация макрофагов может усугубить воспаление и затруднить интеграцию здоровой ткани/имплантата, а правильное управление активацией макрофагов в значительной степени способствует эффективности имплантата и заживлению тканей. 30, 31 Чрезмерное высвобождение IL-8 также разрушает рост эндотелиальных клеток, 32 вызывая уменьшение количества эндотелиальных клеток и образование тромбоцитарного тромба. В отличие от ИЛ-8, повышенная секреция ИЛ-10 может эффективно ингибировать продукцию провоспалительных цитокинов. 33 Тоссетта и др. 34 обнаружили, что IL-1 и трансформирующие факторы роста могут нарушать тесные связи эндотелиальных клеток. Кроме того, при повышенных уровнях ARG1 и IL-10 поверхностный наномассив TNT, вероятно, вызывает поляризацию M2, связанную с заживлением. 35 Следует отметить, что VEGF действует как ключевой регулятор эндотелизации и может синергетически способствовать регенерации тканей. На сегодняшний день VEGF является наиболее эффективным фактором, способствующим эндотелизации. 36 TNT60 продуцировал больше VEGF в нашем исследовании, и, следовательно, воспалительная реакция, вызванная поверхностными макрофагами TNT в этом исследовании, способствует интеграции имплантатов и тканей.

Сосудистые просветы эндотелиальных клеток регулируют динамические пути питательных веществ и клеток. У взрослых процесс неоваскуляризации начинается с высвобождения градуированного VEGF в бедной питательными веществами, ишемической/бескислородной среде, восстанавливая кровоток в этой среде. 37 В исследовании повреждения сосудов на животных отторжение эндотелиальных клеток приводит к образованию тромбов из тромбоцитов. 38 Рост эндотелиальных клеток, включая пролиферацию, адгезию, миграцию, образование и секрецию продуктов на клапанах, играет жизненно важную роль в предотвращении свертывания крови. 39

AMPK ингибирует путь синтеза и активирует катаболический путь для поддержания энергетического гомеостаза. 40 Макрофаги M2 обладают способностью сильно активировать AMPK, 41 , которая является ключевым датчиком энергетического состояния клетки, а также ключевым фактором фосфорилирования и индукции FAO. 42 Активация AMPK может смещать макрофаги в сторону фенотипа M2, что проявляется в увеличении CD206 и снижении экспрессии iNOS. 43 Это согласуется с результатами нашего исследования. Палссон-Макдермотт и соавт. 44 доказали, что активация PKM2 может уменьшить воспалительную реакцию и способствовать поляризации макрофагов M2. Однако AMPK является единственным обнаруженным эффективным путем, а другие сигнальные пути, участвующие в регуляции, нуждаются в дальнейшем изучении.

Общеизвестно, что M1-поляризованные макрофаги усиливают гликолиз, быстро запуская микробицидную активность. Однако неясно, как регулируется гликолитическая активность при поляризации макрофагов М2. Существует несколько исследований взаимосвязи между ТНТ и метаболизмом макрофагов. Наши данные показали, что TNT ингибирует гликолиз макрофагов и активирует сигнальный путь AMPK, способствуя поляризации макрофагов. Можно манипулировать метаболизмом макрофагов, чтобы стимулировать иммунный ответ или даже подавить воспаление в случаях аутоиммунитета.Если это перепрограммирование будет поддерживаться, возможно, посредством эпигенетических изменений, следующих за метаболическими изменениями, то оно может способствовать ремиссии хронических воспалительных заболеваний. До сих пор многие исследования были сосредоточены только на способности TNT загружать лекарство, а целью регулирования поляризации макрофагов является высвобождение лекарств. 45, 46 Однако характеристики тротила в значительной степени игнорируются. Следовательно, были приготовлены ТНТ с разным диаметром, и их способность регулировать поляризацию макрофагов была установлена ​​путем изучения их влияния на гликолиз макрофагов, анализа состояния поляризации макрофагов и моделирования ускорения эндотелизации in vitro.Наши данные показали, что противовоспалительная и эндотелиальная способность ТНТ напрямую связана с его диаметром. Большой размер TNT60 значительно снижает высвобождение провоспалительных факторов и создает противовоспалительную микросреду, способствующую заживлению тканей. Исследования показали, что ТНТ диаметром 120 нм могут эффективно ингибировать рост провоспалительных клеток и высвобождение провоспалительных факторов. 47 Эти результаты соответствовали результатам нашего исследования.Вероятно, поверхностные наномассивы влияют на гидрофильность материала, и это требует дальнейшего изучения. Метаболизм так важен для иммунных клеток, и необходимо выяснить, влияет ли ТНТ на метаболизм. Конечно, наше исследование в настоящее время поверхностно и должно более глубоко изучить механизм влияния ТНТ на клеточный метаболизм. Для эффективной замены клапана требуется лучшая микросреда для интеграции имплантата с тканью. Тротилы, содержащие лекарство, могут быть эффективными, но действуют недолго.Было бы захватывающим достижением, если бы внутренняя иммунная регуляция нанотрубок диоксида титана могла обеспечить интеграцию имплантата и ткани. Однако это только предварительное исследование, и необходимы дальнейшие эксперименты in vivo для получения дополнительных доказательств этого вывода.

6 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Наши результаты показывают, что TNT обладает внутренними иммуномодулирующими эффектами и ингибирует гликолиз макрофагов, активируя сигнальный путь AMPK.Это, в свою очередь, заставляет макрофаги производить меньше воспалительных факторов и способствует поляризации М2. Кроме того, секретируется больше VEGF для ускорения эндотелизации. Чем больше размер TNT (TNT60), тем сильнее эффекты. Наш результат показал, что титановые нанотрубки могут выступать в качестве потенциального подхода к биофункционализации протезов клапанов на основе титана для эндотелизации.

БЛАГОДАРНОСТИ

Это исследование финансировалось Национальной программой исследований и разработок в области высоких технологий (Программа 863) Китая (грант №.2014AA020539), Национальный фонд естествознания Китая (Грант № 81770388, 81860079 и 81660070), Фонд естествознания провинции Цзянси (Грант № 20171ACB21061, 20161BBI, 20192BAB205070, 20204BCJ22028, и 20203BBGL73141), а также исследовательский проект Департамент образования провинции Цзянси (грант № 150274).

    КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

    Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

    ВКЛАД АВТОРОВ

    Вэнь П. Ю проводил эксперименты. Синь Л.

    Leave a Reply

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *